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专利号: 2020103884207
申请人: 福建省农业科学院植物保护研究所
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-27
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种快速鉴定红丝疣孢霉的分子检测引物,其特征在于,其核苷酸序列为:T‑2F: 5’‑GGGAGCGTCTTTGATGATGG ‑ 3’AT‑2R:5’‑GCGCACAAATCTTTGGGGAAT ‑ 3’。

2.利用权利要求1所述的分子检测引物进行红丝疣孢霉快速鉴定的方法,其特征在于,它包括以下步骤:

S1. 提取待测疣孢霉菌的基因组DNA;

S2. 利用引物T‑2F/ AT‑2R对步骤S1提取的DNA进行PCR扩增;

S3. 取步骤S2的PCR扩增产物3.0 μL用1.0%琼脂糖凝胶进行电泳分离,如果扩增出448 bp的条带,则所鉴定的疣孢霉为Mycogone rosea。

3.根据权利要求2所述的红丝疣孢霉快速鉴定的方法,其特征在于,步骤S2中的PCR扩增反应体系为:

反应体系20μL:Taq PCR Master Mix 10μL、10 μmol/L引物T‑2F 0.5μL、10 μmol/L引物AT‑2R 0.5μL、模板DNA 1μL、ddH2O 8μL。

4.根据权利要求3所述的红丝疣孢霉快速鉴定的方法,其特征在于,步骤S2中的PCR扩增反应条件为:

94°C预变性5 min,94°C变性30 sec,59°C退火30 sec,72°C延伸45 sec,36个循环,最后72°C下延伸10 min。

5.根据权利要求2所述的方法在双孢蘑菇湿泡病的红丝疣孢霉的早期诊断、监测和鉴定中的应用。