1.一种用于检测钙需求相关基因SNP位点的试剂盒,其特征在于:包括用于检测钙需求相关的GC基因RS2282679位点、IL‑6基因RS1800795位点、PTH基因RS6254位点、VDR基因RS1544410位点和VDR基因RS2228570位点的引物组合物,所述引物组合物的序列为:GC基因RS2282679位点的正反向PCR引物:SEQ ID No:1‑2,正向延伸引物:SEQ ID No:
11;
IL‑6基因RS1800795位点正反向PCR引物:SEQ ID No:3‑4,正向延伸引物:SEQ ID No:
12;
PTH基因RS6254位点正反向PCR引物:SEQ ID No:5‑6,正向延伸引物:SEQ ID No:13;
VDR基因RS1544410位点正反向PCR引物:SEQ ID No:7‑8,正向延伸引物:SEQ ID No:
14;
VDR基因RS2228570位点正反向PCR引物:SEQ ID No:9‑10,正向延伸引物:SEQ ID No:
15;
GC基因RS2282679位点、IL‑6基因RS1800795位点、PTH基因RS6254位点、VDR基因RS1544410位点和VDR基因RS2228570位点的正向延伸引物浓度比为2:1:3:2:1;
GC基因RS2282679位点、IL‑6基因RS1800795位点、PTH基因RS6254位点、VDR基因RS1544410位点和VDR基因RS2228570位点的各对正反向PCR引物浓度比为1:1:1:1:2;
正向延伸引物序列中的5’端采用不同数量的ploy T修饰;其中,GC基因RS2282679位点、IL‑6基因RS1800795位点、PTH基因RS6254位点、VDR基因RS1544410位点和VDR基因RS2228570位点的正向延伸引物上的ploy T修饰数量依次为:22、16、35、29、19;
纯化后多重PCR产物、正向延伸引物组合物与多重单碱基延伸反应试剂中的SNaPshot Multiplex KitABI的体积比为2:1:1。
2.如权利要求1所述的一种用于检测钙需求相关基因SNP位点的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括以下试剂:
2
(1)多重PCR扩增试剂:包括dNTPs、TaqDNA聚合酶、PCR反应缓冲液、1× GC‑I缓冲液、Mg+
:
(2)PCR产物纯化试剂:AP酶、Exol1酶、Seq buffer;
(3)多重单碱基延伸反应试剂:SNaPshot Multiplex KitABI;
(4)延伸产物纯化试剂:SAP酶;
(5)测序变性反应试剂:120Liz SIZE STANDARD内标、Hi‑Di甲酰胺。
3.如权利要求1所述的一种用于检测钙需求相关基因SNP位点的试剂盒,其特征在于:纯化后的延伸产物与测序变性反应试剂中的120Liz SIZE STANDARD内标、Hi‑Di甲酰胺的体积比为12:3:92。