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专利号: 2020100056197
申请人: 江苏科技大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-03-02
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.利用BmIML‑2基因筛选家蚕核型多角体病毒病抗性的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:(1)选取至少一个家蚕品种为试验材料并饲养至5龄期;采用家蚕核型多角体病毒“BmNPV”溶液浸泡新鲜桑叶;

(2)待上蔟前最后一次给桑时,向每个品种的家蚕幼虫添食步骤(1)的桑叶,然后继续饲养直至上蔟结茧,期间淘汰病死蛹,发蛾后制种;

(3)取步骤(2)制种的蚕蛾,提取组织中的RNA并反转录为cDNA,根据BmIML‑2基因全长序列设计正向引物和反向引物,以cDNA为模板,通过RT‑PCR检测家蚕BmIML‑2基因在每个家蚕品种中的转录水平差异;其中,正向引物序列为:5’‑AGAGTTCGTGTGGCATCTA‑3’,反向引物序列为:5’‑ ACCATATGAGAGGCAGGGTT‑3’;

(4)根据步骤(3)的RT‑PCR检测结果,筛选添食BmNPV后BmIML‑2基因转录水平显著上调的品种及个体所产蚕卵留种继代;

(5)重复步骤(1)至步骤(4),对继代的家蚕品种进行重复筛选6代以上,获得家蚕核型多角体病毒病抗性品种;

其中,步骤(1)中选取的家蚕品种为波照、白玉C3VR6、白玉CB、PAB和菁松;

步骤(3)中所述组织为脂肪体;

验证步骤(5)获得的家蚕品种核型多角体病毒病抗性:将留种继代的蚕卵催青、饲养至

2龄起蚕,然后添食BmNPV,继续饲养至4龄起蚕后统计生存率。

2.根据权利要求1所述的利用BmIML‑2基因筛选家蚕核型多角体病毒病抗性的方法,其

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特征在于,步骤(1)中BmNPV溶液的浓度为1×10‑5×10个/mL。

3.根据权利要求1所述的利用BmIML‑2基因筛选家蚕核型多角体病毒病抗性的方法,其特征在于,步骤(3)中RT‑PCR检测的内参基因选用BmGAPDH基因。

4.根据权利要求1所述的利用BmIML‑2基因筛选家蚕核型多角体病毒病抗性的方法,其特征在于,以下家蚕品种:波照、白玉C3VR6、白玉CB、PAB对核型多角体病毒的抗性比菁松提高了10‑100倍。