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专利号: 201911397707X
申请人: 广东省微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2024-12-09
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种提高C.rhizophorae A761产cytosporaphenones产量的方法,其特征在于,是在C.rhizophorae A761中过表达bam基因,所述的bam基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,是将bam基因插入到表达载体中,然后转化进入C.rhizophorae A761中进行过表达。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切质粒PBGEⅠ-Hyg,根据酶切后PBGEⅠ的序列和bam序列,设计bam引物PBGE1-bam-F:5’-cgataagcttgatatcgATGTACGCTTTGATCATCACCATTGC-3’,PBGE1-bam-R:5’-cctcgactctagaggatcTCAGTGGTGGTGGTGGTGGTG-3’,扩增bam基因片段,利用同源重组的方法将bam基因片段构建到已酶切的质粒PBGE1,构建PBGE1-bam载体,然后将PBGE1-bam载体通过原生质体转化法导入C.rhizophorae A761原生质体中。

4.一种产cytosporaphenones的工程菌株,其特征在于,是在C.rhizophorae A761中过表达bam基因而获得的工程菌,所述的bam基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

5.一种适用于巴戟天内生真菌A761的PBGE1-bam载体的构建方法,其特征在于,其是将bam基因插入到PBGE1载体中。

6.根据权利要求5所述的构建方法,其特征在于,限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切质粒PBGEⅠ-Hyg,根据酶切后PBGEⅠ的序列和bam序列,设计bam引物PBGE1-bam-F:5’-cgataagcttgatatcgATGTACGCTTTGATCATCACCATTGC-3’,PBGE1-bam-R:5’-cctcgactctagaggatcTCAGTGGTGGTGGTGGTGGTG-3’,扩增bam基因片段,利用同源重组的方法将bam基因片段构建到已酶切的质粒PBGE1,构建PBGE1-bam载体。

7.一种根据权利要求5或6所述的构建方法构建得到的PBGE1-bam载体。