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专利号: 2019113839722
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-07-29
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种L-阿拉伯糖差向异构酶突变体,由序列如SEQ ID NO.5所示氨基酸经定点突变而来,所述突变的位点为下列中的一个或多个:(1)第97位、(2)第189位、(3)第301位、(4)第

409位、(5)第462位。

2.如权利要求1所述的L-阿拉伯糖差向异构酶突变体,其特征在于所述突变体由序列如SEQ ID NO.5所示氨基酸经下列之一或多个位点突变而得:(1)第97位甘氨酸G突变为天冬酰胺N、精氨酸R、赖氨酸K、天冬氨酸D或半胱氨酸C,(2)第189位天冬氨酸N突变为丝氨酸S、谷氨酰胺Q、甘氨酸G或组氨酸H,(3)第301位亮氨酸L突变为异亮氨酸I、蛋氨酸M或谷氨酸E,(4)第409位亮氨酸L突变为苯丙氨酸F、脯氨酸P或丝氨酸S,(5)第462位苏氨酸T突变为丙氨酸A、色氨酸W或酪氨酸Y。

3.如权利要求1所述的L-阿拉伯糖差向异构酶突变体,其特征在于所述突变体由序列如SEQ ID NO.5所示氨基酸经下列之一或多个位点突变而得:(1)第97位甘氨酸G突变为赖氨酸K,(2)第189位天冬氨酸N突变为丝氨酸S,(3)第301位亮氨酸L突变为谷氨酸E,(4)第

409位亮氨酸L突变为脯氨酸P,(5)第462位苏氨酸T突变为丙氨酸A。

4.如权利要求3所述的L-阿拉伯糖差向异构酶突变体,其特征在于所述L-阿拉伯糖差向异构酶突变体序列如SEQ ID NO.7所示。

5.权利要求1~4之一所述L-阿拉伯糖差向异构酶突变体在催化D-半乳糖异构化制备D-塔格糖中的应用。

6.如权利要求5所述的应用,其特征在于所述应用为:以含L-阿拉伯糖差向异构酶编码基因的重组基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体或湿菌体经超声破碎后获得的上清液作为催化剂,以D-半乳糖为底物,在Mn2+存在下,在6.0~7.0的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液中,70~

85℃温度下反应,反应结束后,反应液分离纯化,获得D-塔格糖。

7.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述L-阿拉伯糖差向异构酶突变体编码基因序列如SEQ ID NO.8所示。