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专利号: 2019113785135
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-07-29
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种耐高温TIM barrel蛋白突变体,由序列如SEQ ID NO.1所示氨基酸经定点突变而来,所述突变的位点为下列中的一个或多个:(1)第241位、(2)第182位、(3)第201位、(4)第105位、(5)第30位。

2.如权利要求1所述的耐高温TIM barrel蛋白突变体,其特征在于所述耐高温TIM barrel蛋白突变体由序列如SEQ ID NO.1所示氨基酸经下列之一或多个位点突变而得:(1)第241位缬氨酸V突变为赖氨酸K、蛋氨酸M、苯丙氨酸F、脯氨酸P或丝氨酸S;(2)第182位亮氨酸L突变为色氨酸W、酪氨酸Y、谷氨酰胺Q或半胱氨酸C;(3)第201位丙氨酸A突变为H、赖氨酸K或苯丙氨酸F;(4)第105位甘氨酸G突变为亮氨酸L、天冬氨酸D或谷氨酰胺Q;(5)第30位苯丙氨酸F突变为脯氨酸P、缬氨酸V或谷氨酸E。

3.如权利要求2所述的耐高温TIM barrel蛋白突变体,其特征在于所述耐高温TIM barrel蛋白突变体由序列如SEQ ID NO.1所示氨基酸经下列之一或多个位点突变而得:(1)第241位缬氨酸V突变为苯丙氨酸F;(2)第182位亮氨酸L突变为色氨酸W;(3)第201位丙氨酸A突变为苯丙氨酸F;(4)第105位甘氨酸G突变为天冬氨酸D;(5)第30位苯丙氨酸F突变为脯氨酸P。

4.如权利要求3所述的耐高温TIM barrel蛋白突变体,其特征在于所述耐高温TIM barrel蛋白突变体序列如SEQ ID NO.7所示。

5.权利要求1~4之一所述的耐高温TIM barrel蛋白突变体在催化D-果糖异构化制备D-阿洛酮糖中的应用中。

6.如权利要求5所述的应用,其特征在于所述应用为:以含所述耐高温TIM barrel蛋白突变体编码基因的重组基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体或湿菌体经超声破碎后获得的上清液作为催化剂,以D-果糖为底物,在Co2+存在下,在pH7.0~8.0的Na2HPO4/NaH2PO4缓冲液中,80~100℃温度下反应,反应结束后,反应液分离纯化,获得D-阿洛酮糖。

7.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述述耐高温TIM barrel蛋白突变体编码基因序列如SEQ ID NO.8所示。