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专利号: 2019113650509
申请人: 广东食品药品职业学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-08-04
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种植物提取物抗糖化效果的评估方法,其特征在于,包括蛋白糖化交联预防效果的评估方法和蛋白糖化交联抑制效果的评估方法;

所述蛋白糖化交联预防效果的评估方法包括如下步骤a1~a3:

a1:将蛋白和还原糖溶于溶剂中,加入植物提取物,混合均匀后,在无菌无氧条件下以

36~40℃振荡孵化15~30天,制得样品;

a2:以步骤a1的方法制备未加入所述植物提取物的空白对照品;

a3:分别取等量的样品和空白对照品进行SDS‑PAGE电泳分析,测定样品中蛋白的相对分子质量χ1和空白对照品中蛋白的相对分子质量χ2;若χ1小于χ2,说明所述植物提取物具有预防蛋白糖化交联的效果,否则不具有预防蛋白糖化交联的效果;

所述蛋白糖化交联抑制效果的评估方法包括如下步骤b1~b3:

b1:将蛋白与活性醛溶于溶剂中,加入植物提取物,混合均匀后,在无菌无氧条件下以

36~40℃振荡孵化15~30天,制得样品;

b2:将蛋白与活性醛溶于溶剂中,加入与所述植物提取物等量的抗糖化标准物质,混合均匀后,在无菌无氧条件下以36~40℃振荡孵化15~30天,制得空白对照品;

b3:分别取等量的样品和空白对照品进行SDS‑PAGE电泳分析,测定样品中蛋白的相对分子质量у1和空白对照品中蛋白的相对分子质量у2;y1越趋近于y2,说明所述植物提取物抑制蛋白糖化交联的效果越好,否则抑制蛋白糖化交联的效果越差;

其中,所述步骤a1中,还原糖与蛋白的质量比值(还原糖:蛋白)为:大于0且≤5;所述步骤b1中,活性醛与蛋白的质量比值(活性醛:蛋白)为:大于0且≤10。

2.如权利要求1所述的植物提取物抗糖化效果的评估方法,其特征在于,所述蛋白糖化交联预防效果的评估方法还包括:通过计算蛋白糖化交联预防指数来进行蛋白糖化交联预防效果强弱的评估,蛋白糖化交联预防指数越大,蛋白糖化交联预防效果越强,所述蛋白糖化交联预防指数的计算公式包括:式中,χ1为样品中蛋白的相对分子质量,χ2为空白对照品中蛋白的相对分子质量。

3.如权利要求1所述的植物提取物抗糖化效果的评估方法,其特征在于,所述蛋白糖化交联抑制效果的评估方法还包括:通过计算蛋白糖化交联抑制指数来进行蛋白糖化交联抑制效果强弱的评估,蛋白糖化交联抑制指数越大,蛋白糖化交联抑制效果越强,所述蛋白糖化交联抑制指数的计算公式包括:式中,у1为样品中蛋白的相对分子质量,у2为空白对照品中蛋白的相对分子质量。

4.如权利要求1所述的植物提取物抗糖化效果的评估方法,其特征在于,所述蛋白糖化交联预防效果的评估方法和所述蛋白糖化交联抑制效果的评估方法中采用的溶剂为pH=

6.8且浓度为0.01mol/L的Tris‑HCl缓冲液。

5.如权利要求1所述的植物提取物抗糖化效果的评估方法,其特征在于,所述蛋白糖化交联预防效果的评估方法和所述蛋白糖化交联抑制效果的评估方法中采用的蛋白为牛血清白蛋白、人血清白蛋白、胶原蛋白、乳白蛋白、酪蛋白、卵清蛋白中的至少一种。

6.如权利要求1所述的植物提取物抗糖化效果的评估方法,其特征在于,所述蛋白糖化交联预防效果的评估方法中采用的还原糖为葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖中的至少一种。

7.如权利要求1所述的植物提取物抗糖化效果的评估方法,其特征在于,所述蛋白糖化交联抑制效果的评估方法中采用的活性醛为乙二醛、丙酮醛、甘油醛、脱氧葡萄糖醛酮中的至少一种。

8.如权利要求1所述的植物提取物抗糖化效果的评估方法,其特征在于,所述蛋白糖化交联抑制效果的评估方法中采用的抗糖化标准物质为氨基胍、与氨基胍有关的化合物、吡哆胺、2‑异亚丙基肼基‑4‑氧噻唑烷‑5‑基乙酰苯胺、苯并噻唑鎓衍生物、替尼西坦、类黄酮、乙二醛酶、阿马道莱酶、果糖胺‑3‑激酶及赤藓糖醇中的至少一种。