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专利号: 2019111449657
申请人: 福建省农业科学院植物保护研究所
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-27
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种用于染黄龙病长春花叶片基因表达研究的内参基因,其特征在于,包括SPOC、ENTH1和EF-1;所述SPOC基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,ENTH1基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,EF-1基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

2.一种用于染黄龙病长春花叶片基因表达研究的内参基因的构建方法,其特征在于,具体包括以下步骤:(1)选择长春花植株嫁接染黄龙病的长春花枝条,待黄龙病症状显现后,选取染病长春花叶片以及未嫁接病害的健康长春花叶片作为样品,提取RNA、反转录合成cDNA;

(2)根据转录组测序结果筛选出10个在健康和患黄龙病状态下表达较稳定的基因,SPOC、ENTH1、EF-1、MDH、ACTIN7、FBOX7、GAPDH、GDI1、PP2C、UBA1,分别设计这10个基因的引物,进行荧光定量PCR反应,根据荧光强弱来反应扩增状况并得到Ct值;

(3)根据Ct值,使用geNorm、Normfinder和BestKeeper、Delta CT软件进行评价,并做出综合评价,最终筛选得到基因表达稳定性综合评价排名前三位的SPOC、ENTH1和EF-1基因作为长春花的内参基因。

3.一种如权利要求1所述的内参基因在检测长春花黄龙病中的应用。