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专利号: 2019109173121
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-08-30
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种固定化α-葡萄糖苷酶,其特征在于,所述固定化α-葡萄糖苷酶按照如下方法制备:(1)树脂预处理;

(2)向经过预处理的树脂中加入α-葡萄糖苷酶,进行吸附;

(3)向步骤(2)吸附后的体系,加入戊二醛,进行交联;

(4)将步骤(3)交联后的溶液离心弃上清,用缓冲液反复洗涤,直至洗涤液中检测不到酶活,即得到固定化酶。

2.如权利要求1所述的固定化α-葡萄糖苷酶,其特征在于,所述树脂的添加量为0.45~

0.55g,添加的α-葡萄糖苷酶总酶活为150~300U。

3.如权利要求1所述的固定化α-葡萄糖苷酶,其特征在于,所述缓冲液为pH为7.0~

8.5、浓度为45~55mmol/L的磷酸盐缓冲液。

4.如权利要求1所述的固定化α-葡萄糖苷酶,其特征在于,所述吸附是在20~25℃、200~220r/min条件下吸附3~6h。

5.如权利要求1所述的固定化α-葡萄糖苷酶,其特征在于,所述交联是于3~5℃静置,加入0~0.08%(V:V)的戊二醛,于3~5℃静置交联1~3h。

6.如权利要求1所述的固定化α-葡萄糖苷酶,其特征在于,所述树脂为阴离子交换树脂Amberlite FPA90 Cl。

7.如权利要求1所述的固定化α-葡萄糖苷酶,其特征在于,所述树脂预处理的步骤包括:用2~3倍树脂体积的90~95%乙醇浸泡20~24h,弃杂液,洗去杂质和浮色,直至溶液pH为6.5~7.5;以0.8~1.2mol/L NaOH浸泡树脂4~6h,洗涤,直至溶液pH为6.5~7.5;再以

0.8~1.2mol/L HCl浸泡树脂4~6h,洗涤,直至溶液pH为6.5~7.5。

8.权利要求1~7任一所述的固定化α-葡萄糖苷酶在生产黑曲霉低聚糖中的应用,其特征在于,以固定化α-葡萄糖苷酶为催化剂,以麦芽糖为底物,制备黑曲霉低聚糖。

9.如权利要求8所述的应用,其特征在于,所述麦芽糖的浓度为200~400g/L,固定化α-葡萄糖苷酶的添加量为5~20U/g麦芽糖,反应条件为55~75℃条件下反应20~48h。

10.制备权利要求1所述固定化酶的方法。