利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2019107760639
申请人: 重庆医科大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-07-01
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种高灵敏的吲哚电化学检测方法,其特征在于,包括如下具体步骤:

(1)金磁纳米粒子(Gold magnetic particles,GMPs)复合材料的合成:将5.0mg/mL磁性Fe3O4纳米粒子分散于含0.05mmol/L HAuCl4、125.0mmol/L异丙醇和

10.0mg/mL聚乙烯醇水溶液中,形成含0.1mg/mL Fe3O4纳米粒子的混合溶液;将混合溶液超声15min,超声功率为120W,分散均匀后,置于玻璃试剂瓶中,采用6.0MeV的高能电子束进行辐照,辐照剂量为6kGy,得到分散均匀的GMPs复合材料,再置于4℃冰箱避光保存。

(2)Indole-diazo-ATP@GMPs复合物的制备:

a.将上述步骤(1)中制备的所述GMPs复合材料与等体积的1.0mmol/L 4-氨基苯硫酚(4-ATP)甲醇/水(1/49,v/v)溶液(由1mL 50.0mmol/L的4-ATP甲醇溶液加49mL水稀释而成)混合均匀,孵育12h;将混合溶液置于磁性分离器上,用超纯水洗涤后,再用1mL盐酸(pH 

3.0)重新分散,得到ATP@GMPs复合物水溶液,置于4℃冰箱避光保存;

b.取1mL步骤a中得到的所述ATP@GMPs复合物,加入100μL 10.0mmol/L NaNO2水溶液得到混合溶液,在冰水浴条件下置于快速振荡器中的微孔板上进行重氮化反应,反应时间

30min,得到diazo-ATP@GMPs复合物溶液;

c.吲哚标准溶液准备:将1.0mg吲哚标准品溶于1mL水中配置成1.00g/L吲哚标准储存液,用0.1mol/L PBS(pH 5.0)稀释1.00g/L吲哚标准储备液得到系列浓度的吲哚标准溶液;

d.取70μL步骤b中得到的所述diazo-ATP@GMPs复合物溶液,加入100μL步骤c中得到的吲哚标准液,用NaOH溶液调节混合溶液的pH值至5.0,在冰水浴条件下置于快速振荡器中的微孔板上进行偶合反应,反应时间35min,制得Indole-diazo-ATP@GMPs复合物。

(3)电化学检测

将步骤(2)中得到的所述Indole-diazo-ATP@GMPs复合物置于磁性分离器上,用

0.1mol/L PBS(pH 5.0)洗涤3次,然后滴涂于丝网印刷碳电极(Screen printed carbon electrode,SPCE)工作电极表面,自然晾干;将SPCE与电化学工作站连接,并在SPCE下面放置磁铁,滴加50μL pH值为7.0的支持电解质溶液于所述电极表面,采用示差脉冲伏安法,进行吲哚的检测。

2.根据权利要求1所述的电化学检测方法,其特征在于,所述SPCE包括一印制电极的聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)基片、PET基片上印制的外部绝缘层和基片上一端的导线接口,其特征在于所述的基片上还印制有三个电极,分别为碳工作电极、Ag/AgCl参比电极和Ag/AgCl对电极,三个电极形成一圆形工作区域,各电极通过绝缘膜下印制的导线与接口相连。

3.根据权利要求1-3所述的电化学检测方法,其特征在于,所述的pH值为7.0的支持电解质溶液由含0.10mol/L K2SO4的0.10mol/L NaH2PO4-Na2HPO4缓冲溶液组成。

4.根据权利要求1-3所述的电化学检测方法,其特征在于,所述电化学工作站的参数设置为:低电位0.2V,高电位1.0V,振幅100mV,脉冲宽度0.05s,脉冲周期0.2s。