1.一种基于转人血小板衍生生长因子基因蚕丝的蛋白丝胶凝胶,其特征在于:所述蛋白丝胶凝胶由转人血小板衍生生长因子基因家蚕的茧壳用含尿素的抽提试剂提取含人血小板衍生生长因子的丝胶蛋白溶液,用含尿素的透析液透析后诱导丝胶胶化反应,形成固态的丝胶水凝胶,再对丝胶水凝胶进行透析清除尿素,制得含转人血小板衍生生长因子的蛋白丝胶凝胶;所述抽提试剂各组分浓度如下:50mM Tris-HCl,8M urea,pH 7.0;所述含尿素的透析液各组分的浓度如下:50mM Tris-HCl,4 M urea,pH 8.0。
2.根据权利要求1所述的蛋白丝胶凝胶,其特征在于:所述提取含人血小板衍生生长因子的丝胶蛋白溶液的具体方法如下:将转人血小板衍生生长因子基因家蚕的茧壳,粉碎成粉末,以50mg/ml的浴比,利用抽提缓冲液在80℃水浴锅中萃取45 min,然后用去除未溶解的蚕丝,再经过 18000rpm、25℃离心30 min,取上清,得到丝胶蛋白溶液;所述抽提缓冲液各组分浓度如下:50mM Tris-HCl,8M urea,pH 7.0;
所述透析为向丝胶蛋白溶液中加入相当于丝胶蛋白溶液体积1/4的pH 9.0、浓度为1M 的Tris-HCl,装入截留分子量为3500 Da的透析袋,放入透析液中在16 ℃中透析12 h;所述透析液为各组分浓度如下:50mM Tris-HCl,4 M urea,pH 8.0。
3.根据权利要求1所述的蛋白丝胶凝胶,其特征在于:所述丝胶水凝胶进行透析的方法是使用PBS溶液中,在4℃下进行透析,每12h置换一次PBS溶液,共置换6次。
4.根据权利要求1所述的蛋白丝胶凝胶,其特征在于:所述诱导丝胶的胶化反应为在4℃中放置至少24 h。
5.根据权利要求1 4任一项所述的蛋白丝胶凝胶,其特征在于:所述蛋白丝胶凝胶的断~
裂强度为7.75±0.42 kPa,压缩模量为74.91±2.9 kPa。
6.根据权利要求1 4任一项所述的蛋白丝胶凝胶,其特征在于:所述蛋白丝胶凝胶的总~
丝胶蛋白浓度为0.512 mg/mL,PDGF-BB蛋白的浓度为1.6 μg/mL。
7.含转人血小板衍生生长因子的蛋白丝胶凝胶的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:由转人血小板衍生生长因子基因家蚕的茧壳用含尿素的抽提试剂提取含人血小板衍生生长因子的丝胶蛋白溶液,用含尿素的透析液透析后诱导丝胶胶化反应,形成固态的丝胶水凝胶,再对丝胶水凝胶进行透析清除尿素,制得含转人血小板衍生生长因子的蛋白丝胶凝胶。
8.权利要求1 6任一项所述蛋白丝胶凝胶在制备促进细胞增殖的生物材料中的应用。
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