1.一种用于淡水养殖水体中孔雀石绿残留量的液相色谱-可见光和荧光同时检测的前处理方法,其特征是:具体步骤是:
将20mL养殖淡水经0.45μm膜过滤后,置于离心管中,再依次加入提取液Ⅰ2mL,提取液Ⅱ
20mL,涡旋混合器上充分混合后,再加入15g无水硫酸钠固体,4500r/min离心15min后,将离心管中上清液倒入100mL蒸发瓶中,采用旋转蒸发仪,减压蒸干溶剂,向蒸发瓶中加入质量浓度为1%硼氢化钾溶液和1mL乙腈,超声波震荡后,将蒸发瓶中溶液转出,1mL乙腈洗涤蒸发瓶,合并溶液并定容至3mL,0.45μm膜过滤后进样,液相色谱-可见光和荧光法同时测定孔雀石绿残留量;
1)所述提取液Ⅰ配制方法:对甲苯磺酸0.24g,盐酸羟胺3g,溶于超纯水中,定容至
100mL;
2)所述提取液Ⅱ为体积比为1:2的乙腈和二氯甲烷混合溶液。
2.根据权利要求1所述的用于淡水养殖水体中孔雀石绿残留量的液相色谱-可见光和荧光同时检测的前处理方法,其特征是:所述超声波功率为240W~400W,超声波震荡时间为
3min~9min。
3.根据权利要求1所述的用于淡水养殖水体中孔雀石绿残留量的液相色谱-可见光和荧光同时检测的前处理方法,其特征是:所述旋转蒸发仪转速为30r/min~70r/min,水温30℃~45℃。
4.根据权利要求1所述的用于淡水养殖水体中孔雀石绿残留量的液相色谱-可见光和荧光同时检测的前处理方法,其特征是:所述质量浓度为1%硼氢化钾用量为1mL。
5.根据权利要求1所述的用于淡水养殖水体中孔雀石绿残留量的液相色谱-可见光和荧光同时检测的前处理方法,其特征是:液相色谱-可见光和荧光同时检测方法:Develosil ODS-UG色谱柱,250mm×4.6mm,5μm;流动相为0.125mol/L乙酸铵-乙腈,其中乙酸铵的pH4.5,乙酸铵和乙腈的体积比为20:80,;流速1.0mL/min;柱温35℃;进样量20μL;可见光检测波长618nm,荧光检测器激发波长265nm,发射波长360nm。
6.根据权利要求1所述的用于淡水养殖水体中孔雀石绿残留量的液相色谱-可见光和荧光同时检测的前处理方法,其特征是:液相色谱-可见光和荧光同时检测时,液相色谱-可见光检测或液相色谱-荧光检测样品中孔雀石绿残留量的计算公式:其中:X——样品中孔雀石绿残留量,μg/mL;CS——待测组分标准工作液的浓度,μg/mL;
A——样品中待测组分的峰面积;AS——待测组分标准工作液的峰面积;V——样液最终定容体积,μg/mL;Vs——样品体积,mL;
本计算方法中孔雀石绿残留量测定结果是指孔雀石绿和它的代谢物隐性孔雀石绿残留量的和,以孔雀石绿表示;
液相色谱-可见光检测的样品中孔雀石绿残留量与液相色谱-荧光检测的样品中孔雀石绿残留量的总和为最终样品中孔雀石绿残留量。