1.一种式Ⅰ化合物，其其特征是，结构式如下所示：

2.一种上述式Ⅰ化合物的制备方法，其特征是，包括以香豆素120及化合物1为原料通过以下反应路线制备：其中，R为卤素或羟基。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征是，香豆素120与化合物1进行酰胺化反应后获得。

4.如权利要求2所述的制备方法，其特征是，R为卤素；优选的，R为Cl。

5.如权利要求2所述的制备方法，其特征是，反应的温度为25～30℃；优选的，温度为

27.5～28.5℃；

或，反应体系在惰性气氛下进行；

或，反应体系采用的溶剂为四氢呋喃；

或，香豆素120及化合物1的摩尔比为1:0.9～1.1。

6.一种权利要求1所述的式Ⅰ化合物在检测半胱氨酸中的应用。

7.一种特异性双光子成像荧光探针，其特征是，包括权利要求1所述的式Ⅰ化合物。

8.一种权利要求1所述的式Ⅰ化合物或权利要求7所述的荧光探针在检测细胞和/或脑部中半胱氨酸中的应用。

9.一种半胱氨酸的检测方法，其特征是，将权利要求1所述的式Ⅰ化合物或权利要求7所述的荧光探针放入待测溶液中进行反应，然后进行荧光检测。

10.如权利要求9所述的检测方法，其特征是，采用单光子荧光成像，激发波长为340nm，发射波段为360～550nm；

或，采用双光子荧光成像，激发波长为754nm，发射波段为390～550nm。