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专利号: 2019103423227
申请人: 西南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种川桑N-乙酰-5羟色胺转移酶SNAT5,其特征在于:所述川桑N-乙酰-5羟色胺转移酶SNAT5的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

2.根据权利要求1所述川桑N-乙酰-5羟色胺转移酶SNAT5,其特征在于:编码川桑N-乙酰-5羟色胺转移酶SNAT5的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

3.一种川桑N-乙酰-5羟色胺转移酶基因SNAT5,其特征在于:所述川桑N-乙酰-5羟色胺转移酶基因SNAT5的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

4.权利要求1所述川桑N-乙酰-5羟色胺转移酶SNAT5在作为5-羟色胺转化为N-乙酰-5羟色胺、色胺转化为N-乙酰-5羟色胺、或5-甲氧-色胺转化为褪黑素的催化剂中的应用。

5.权利要求3所述川桑N-乙酰-5羟色胺转移酶基因SNAT5在宿主细胞中重建褪黑素合成途径中的应用,其特征在于:所述SNAT5为5-羟色胺转化为N-乙酰-5羟色胺、色胺转化为N-乙酰-5羟色胺、或5-甲氧-色胺转化为褪黑素的关键酶基因中的应用。

6.一种制备重组川桑N-乙酰-5羟色胺转移酶SNAT5的方法,其特征在于:所述将如SEQ ID NO.3所示的川桑N-乙酰-5羟色胺转移酶SNAT5基因连入Pcold-tf质粒KpnⅠ和BamHI酶切位点,获得重组表达载体Pcold-tf-SNAT5,再将获得的重组表达载体转化表达菌株B21(DE3),在28℃、IPTG终浓度为1mM条件下诱导表达,提取,纯化,获得重组川桑N-乙酰-5羟色胺转移酶SNAT5。

7.根据权利要求6所述制备重组川桑N-乙酰-5羟色胺转移酶SNAT5的方法,其特征在于:所述提取的方法是收集菌体,在功率为200W条件下超声破碎,超声总时间15min,每超声

1s,暂停3s;然后在4℃、15000g条件下离心20min,收集上清。

8.根据权利要求6所述制备重组川桑N-乙酰-5羟色胺转移酶SNAT5的方法,其特征在于:所述纯化是使用镍柱纯化,用含咪唑浓度为100mM的洗脱液进行洗脱。

9.由权利要求6~8任一项所述的方法制得的重组川桑N-乙酰-5羟色胺转移酶SNAT5。

10.权利要求9所述重组川桑N-乙酰-5羟色胺转移酶SNAT5在作为5-羟色胺转化为N-乙酰-5羟色胺、色胺转化为N-乙酰-5羟色胺、或5-甲氧-色胺转化为褪黑素的催化剂中的应用。