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专利号: 2019103082415
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-27
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种检测人体可溶性去唾液酸糖蛋白受体的方法,其特征在于,以半乳糖基化人血清白蛋白作为ASGPR的特异性配体,应用ELISA法进行检测。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法具体为:用CBS缓冲液稀释的GSA包被酶标板,4℃包被12~24h,随后用洗涤缓冲液洗涤;在包被好的酶标板中加入封闭液,

35~37℃封闭1.5~2.5h;弃封闭液,用洗涤缓冲液洗涤;向酶标板中加入样品,35~37℃孵育2~2.5h,随后用洗涤缓冲液洗涤,拍干;加入ASGPR1一抗35~37℃孵育2~2.5h,随后洗涤缓冲液洗涤;加入HRP标记的羊抗鼠酶标二抗,35~37℃孵育1~2h,洗涤缓冲液洗涤;用TMB显色液显色,避光孵育10~20min,随后立即用H2SO4终止显色;测定450nm处吸光度。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述CBS缓冲液的浓度为0.03~0.08M。

4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述GSA的包被浓度为15~25μg/mL。

5.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述ASGPR一抗购自Santa  Cruz Biotechnology,货号为sc-166633;所述酶标二抗稀释2000倍后添加;所述酶标二抗购自康为世纪生物科技有限公司,货号为CW0102。

6.一种检测人体可溶性去唾液酸糖蛋白受体的试剂盒,其特征在于,包括经GSA包被的酶标板、封闭液、ASGPR标准品、ASGPR一抗、羊抗鼠酶标二抗、终止液和洗涤缓冲液。

7.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述洗涤缓冲液包括第一洗涤缓冲液和第二洗涤缓冲液;所述第一洗涤缓冲液为PBS缓冲液;所述第二洗涤缓冲液为PBST缓冲液。

8.根据权利要求6所述的试剂盒,其特征在于,所述封闭液是脱脂牛奶和PBST缓冲液的混合物;所述终止液为H2SO4溶液。

9.权利要求1~5任一所述方法在检测肝功能指标中的应用。

10.权利要求6~8任一所述的试剂盒在生物、医学检测领域中的应用。