1.一种用于纤维素结合域融合酶固定化的磷酸改性甘蔗髓不溶性载体的制备方法,其特征在于:该制备方法包括如下步骤:甘蔗髓→粉碎→筛分→甘蔗髓粉→用水充分浸泡→滤除水份→加入体积百分比>
85%的浓磷酸→搅拌均匀分散→冰浴1~2h→滤除不溶物→收集滤浆→加入冰水稀释→常温搅拌0.5~1h→充分沉淀→过滤或离心→收集沉淀→用水洗涤沉淀3次→用水重悬沉淀→用Na2CO3或NaOH溶液调节悬浊液pH接近中性→过滤或离心→收集沉淀→用水洗涤沉淀5次→过滤或离心→收集沉淀→磷酸改性甘蔗髓不溶性载体;具体步骤如下:(1)将甘蔗髓用粉碎机粉碎,用60目的筛子筛分,收集筛过物即细粉,称为甘蔗髓粉;
(2)将甘蔗髓粉用4~6倍质量的水浸泡5~10h,滤除水分,获得湿甘蔗髓粉;
(3)冰浴条件下,在湿甘蔗髓粉中边搅拌边缓慢加入湿甘蔗髓粉质量40~60倍的已于-
5~-10℃预冻的浓磷酸,继续在冰浴下间歇搅拌1~2h,直至混合物变透明;
(4)用80或100目的不锈钢网筛滤除不溶物,获得甘蔗髓浆;
(5)常温搅拌下缓慢加水将甘蔗髓浆稀释40~60倍,继续间歇搅拌0.5~1h,使甘蔗髓充分沉淀,抽滤,收集甘蔗髓沉淀;
(6)在甘蔗髓沉淀中加入其20~30倍质量的水,搅拌重悬,再抽滤,收集甘蔗髓沉淀,重复洗涤3次,以洗除磷酸;
(7)在甘蔗髓沉淀中加入其20~30倍质量的水,搅拌重悬,用碱液2mol/L Na2CO3或
1mol/LNaOH溶液调节悬浊液pH接近中性,中和残余的磷酸,抽滤收集甘蔗髓沉淀;
(8)按照步骤(6)用水重复洗涤甘蔗髓沉淀5次,收集沉淀,即为磷酸改性甘蔗髓不溶性载体。
2.根据权利要求1所述的一种用于纤维素结合域融合酶固定化的磷酸改性甘蔗髓不溶性载体的制备方法,其特征在于:步骤(3)所述浓磷酸为市售浓磷酸,磷酸体积百分比浓度大于85%。
3.根据权利要求1所述的一种用于纤维素结合域融合酶固定化的磷酸改性甘蔗髓不溶性载体的制备方法,其特征在于:步骤(2)、(5)、(6)、(7)、(8)所述水为自来水、去离子水、蒸馏水或工业处理软水。
4.根据权利要求3所述的一种用于纤维素结合域融合酶固定化的磷酸改性甘蔗髓不溶性载体的制备方法,其特征在于:所述水为去离子水、蒸馏水或工业处理软水。
5.根据权利要求1所述的一种用于纤维素结合域融合酶固定化的磷酸改性甘蔗髓不溶性载体的制备方法,其特征在于:步骤(7)所述碱液为2mol/LNa2CO3或1mol/LNaOH。