1.一种植物组织荧光显微成像分析方法,其特征是,使用有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜。
2.如权利要求1所述的植物组织荧光显微成像分析方法,其特征是,以0.1-1mg/mL的复合纳米膜水溶液培养生物组织。
3.如权利要求1或2所述的植物组织荧光显微分析方法,步骤如下:(1)取植物组织,置于培养液中室温下浸泡5-10h;培养液为浓度为0.1-1mg/mL;
(2)将浸泡过的植物组织用纱布包好,并转移至培养皿中,将培养皿转移至20-35℃的恒温箱中,恒温箱相对湿度保持为50-70%;定期用培养液使纱布保持湿润,培养植物组织
2-7天。
(3)取步骤(2)培养的植物组织,切片,进行LSCM观测。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述培养液为有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜水溶液。
5.如权利要求3所述的方法,其特征在于,所述的有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜,二氧化硅与有机聚合物的质量为(0.005-0.5):1。
6.如权利要求3所述的方法,其特征在于,浓度为0.005mg/mL的复合纳米膜水溶液,在
240-400nm波长激发下,其发射峰位于437±4nm(即433-440nm),相对量子产率为74-81%。
7.如权利要求1-6任一项所述的方法,其特征在于,一种有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜,采用下列制备方法制备:
1)获得具有荧光特性的有机聚合物粉体;
2)将步骤1)中所述有机聚合物粉体在超声辅助下溶解于蒸馏水中,获得具有荧光特性的有机聚合物纳米膜水溶液A;
3)往步骤2)所得A溶液中加入有机硅的乙醇溶液;室温下搅拌反应4-12h,得混合液B;
所述的有机硅,其水解后产生的二氧化硅与步骤1)所述有机聚合物粉体的质量比为(0.005-0.5):1。
4)将步骤3)所得混合液B冷冻干燥,获得具有荧光特性的有机聚合物/二氧化硅复合纳米膜粉体。
8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,步骤1)所述的有机聚合物粉体的制备,包括下列步骤:a.将柠檬酸与半胱氨酸混合、研磨,得混合物C;半胱氨酸,为L-半胱氨酸或D-半胱氨酸。所述步骤a中的柠檬酸与半胱氨酸,其物质的量之比为2:1。
b.将混合物C转移至容器D中,将容器D置于可控温加热炉中160℃加热1h,将容器D从加热炉中取出,置于室温环境中冷却,得有机聚合物粉体。所述容器,其材质为不锈钢、玻璃或陶瓷。所述步骤b中的混合物C与容器D,混合物C的体积不超过占容器D容积的50%。
9.如权利要求7所述的方法,其特征在于,步骤2)所述的有机聚合物粉体溶解于蒸馏水,其聚合物浓度为1mg/mL。步骤2)所述的超声辅助,其超声功率为100W,超声时长为5min。
步骤3)所述的有机硅,为正硅酸乙酯、二甲基二甲氧基硅烷、3-(2,3-环氧丙氧)丙基三甲氧基硅烷、辛基三乙氧基硅烷、十七氟癸基三乙氧基硅烷、十二烷基三乙氧基硅烷其中的一种或它们之间的组合。
步骤3)所述的乙醇溶液,其中,乙醇溶液的体积与步骤2)中所述蒸馏水的体积比为1:(1-9)。
步骤3)所述的搅拌,搅拌方式为磁力搅拌或机械搅拌,搅拌速率为100-300转/分。
10.如权利要求7所述的方法,其特征在于,步骤4)所述的冷冻干燥,其冷冻温度为零下
40-50℃,真空度小于200Pa。