1.一种多元分析的蛇毒混合物分析荧光传感器,其特征是:该荧光传感器包括基底以及在所述基底上的荧光染料和蛇毒蛋白的溶液;所述荧光传感器由四种不同的荧光染料溶液按列均匀点涂在作为基底的384微孔板上,保持一行是单一的染料,作为空白样,再将含有不同蛇毒代表性蛋白的溶液按列点涂在已经点涂了荧光染料溶液的384微孔板中,保持一列是没有蛋白的染料,作为对照样,从而得到所述蛇毒混合物分析荧光传感器;
3
所述四种不同的荧光染料溶液分别是浓度为6.054×10 mg/mL的曙红Y溶液、浓度为
3 3
194.690×10mg/mL的异硫氰酸荧光素异构体I溶液、浓度为14.516×10mg/mL的磺酰罗丹3
明B溶液和浓度为17.393×10mg/mL达旦黄溶液;
所述蛇毒代表性蛋白选自六种蛇毒代表性蛋白,分别是磷脂酶A2、透明质酸酶、心脏毒素、α‑神经毒素、凝血酶及血凝酶;
通过不同蛋白对不同荧光染料的结合程度、结合方式不同所表现出来的独特的荧光指纹信号,能够分析辨别出蛇毒中多组分混合蛋白。
2.根据权利要求1所述的多元分析的蛇毒混合物分析荧光传感器,其特征是:所述荧光染料溶液是由染料粉末和溶剂组成,所述溶剂为去离子水。
3.根据权利要求1所述的多元分析的蛇毒混合物分析荧光传感器,其特征是:所述蛇毒代表性蛋白的溶液是由蛋白质冻干粉和溶剂组成,所述蛇毒代表性蛋白的溶液中,溶液浓度均为1mg/mL,所述溶剂为去离子水。
4.根据权利要求1所述的多元分析的蛇毒混合物分析荧光传感器,其特征是:所述蛇毒代表性蛋白的溶液分别为血凝酶0.01mg/mL、心脏毒素0.05mg/mL、α‑神经毒素0.1mg/mL、磷脂酶A2 0.5mg/mL、透明质酸酶1mg/mL、凝血酶5mg/mL。
5.根据权利要求1所述的多元分析的蛇毒混合物分析荧光传感器,其特征是:将凝血酶、α‑神经毒素、磷脂酶A2粉末分别以0.01 mg/mL、0.02 mg/mL、0.05 mg/mL、0.1 mg/mL、
0.2 mg/mL、0.5 mg/mL的浓度梯度,配置于去离子水中,得到多浓度梯度的所述蛇毒代表性蛋白的溶液,以实现所述荧光传感器对多浓度梯度蛋白的辨别分析。
6.根据权利要求1‑5任意一项权利要求所述的多元分析的蛇毒混合物分析荧光传感器,其特征是:用于对不同浓度的血凝酶、心脏毒素、α‑神经毒素、磷脂酶A2、透明质酸酶、凝血酶辨别分析。
7.一种基于多元分析的蛇毒混合物分析方法,其特征是:该方法包括以下步骤:(1)将四种不同的荧光染料溶液按列分别点涂在384微孔板上,保持一行是单一的染3
料,作为空白样;所述四种不同的荧光染料溶液分别为浓度为6.054×10mg/mL的曙红Y溶
3 3
液、浓度为194.690×10mg/mL的异硫氰酸荧光素异构体I溶液、浓度为14.516×10mg/mL的3
磺酰罗丹明B溶液、浓度为17.393×10mg/mL达旦黄溶液;
(2)将不同的蛇毒蛋白溶液分别点涂在已经点涂了所述四种不同的荧光染料溶液的
384微孔板中,保持一列是没有蛋白的染料,作为对照样;所述蛇毒蛋白选自磷脂酶A2、透明质酸酶、心脏毒素、α‑神经毒素、凝血酶及血凝酶,或者所述蛇毒蛋白选自长白山白眉蝮蛇蛇毒蛋白、银环蛇蛇毒蛋白、五步蛇蛇毒蛋白、蝰蛇蛇毒蛋白、眼镜蛇蛇毒蛋白、江浙蝮蛇蛇毒蛋白及眼镜王蛇蛇毒蛋白;
(3)通过多通道凝胶分析系统在302nm和365nm两种激发光下记录CH1:450nm,CH2:
480nm,CH3:505nm,CH4:535nm,CH5:570nm,CH6:605nm共6个通道的荧光传感信息,采集得到的荧光传感信息采用线性判别分析LDA和分层聚类分析HCA对蛇毒中代表性蛋白进行辨别分析。
8.根据权利要求7所述的基于多元分析的蛇毒混合物分析方法,其特征是,所述蛇毒蛋白溶液是由多种蛋白混合而成的多组分蛋白混合溶液,所述的多组分蛋白混合溶液分为以下7种组分:磷脂酶A2和α‑神经毒素,α‑神经毒素和血凝酶,α‑神经毒素和凝血酶,凝血酶和血凝酶,透明质酸酶、心脏毒素和α‑神经毒素,透明质酸酶、心脏毒素和血凝酶,磷脂酶A2、血凝酶和凝血酶。