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专利号: 2019100055721
申请人: 重庆工商大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种催化反应中酶循环使用的方法,其特征在于具体方法步骤如下:(1)透析袋的处理

选择适宜截留分子量的市售透析袋,按照透析袋的容积︰质量分数为2~4%碳酸氢钠溶液的体积︰质量分数为0.5~1.5%EDTA溶液的体积之比为1︰5~10︰5~10的比例,将透析袋置于碳酸氢钠溶液与EDTA溶液的混合液中,在温度为60~80℃的条件下,预处理1~2h,分别收集预处理后的液体和预处理后的透析袋;然后再按照透析袋的容积︰纯化水的体积之比为1︰30~50的比例,将预处理后的透析袋置于纯化水中,在温度为60~80℃的条件下,清洗1~2h,分别收集清洗后的液体和清洗后的透析袋;对于收集的清洗后的透析袋,即为处理后的透析袋;其中,透析袋截留分子量的选择标准为:底物分子量<透析袋截留分子量<

0.1~0.8倍酶分子量;

(2)透析反应器的组装

第(1)步完成后,先按照市售酶的质量︰纯化水的体积比为1 g︰300~1500 mL的比例,将酶分散于纯化水中,再放入超声波处理器中,控制温度为30~40℃,进行超声处理5~

10min;超声完成后,收集分散液,即为酶液;再按照第(1)步收集的处理后的透析袋的容积︰酶液的体积之比为1︰0.2~0.5的比例,将酶液置于一端已用透析袋夹封闭的处理后的透析袋中,然后将另一端也用透析袋夹封闭,就组装出透析反应器,在温度为4~8℃下保存备用;

(3)底物体系的制备

以底物为原料,按照底物的质量︰缓冲溶液的体积之比为1 g︰50~300 mL的比例,将底物均匀分散于缓冲溶液中,收集溶液,即为底物体系;

(4)透析催化反应

第(3)步完成后,按照第(2)步组装的透析反应器︰第(3)步收集的底物体系的体积比为

1︰30~200的比例,将透析反应器置于底物体系中,在温度为25~40℃,搅拌速度为100~

250r/min下,进行透析催化反应2~10h,反应结束后,生成的产物不断扩散到透析袋外,分别收集反应后的底物体系和反应后的透析反应器;

(5)透析反应器的回收

第(4)步完成后,将第(4)步收集的反应后的透析反应器置于冷冻离心机中,在温度为4~8℃,转速为2000~3000r/min下,冷冻离心1.5~3h,分别收集离心后的液体和离心后的透析反应器;对于收集的离心后的透析反应器,按照第(2)步补加纯化水后继续作为透析反应器使用。