1.一种含木瓜蛋白酶的铁-铜复合磁性纳米花的制备方法,其特征在于:该方法是将氨基修饰的磁性Fe3O4纳米粒子溶液与木瓜蛋白酶溶液混合后,再加入铜离子无机盐溶液,得到含木瓜蛋白酶的铁-铜复合磁性纳米花,所述氨基修饰的磁性Fe3O4纳米粒子按下述方法制得:将100~500mg磁性Fe3O4纳米粒子加入100g浓度为400mmol/L的尿素水溶液中超声,然后按照摩尔比为2:10:6:14:1的比例分别加入溴化十六烷基三甲基铵、正丁醇、环己烷、正硅酸乙酯和3-氨丙基三乙氧基硅烷,搅拌均匀后在40~70℃条件下反应24小时,其中,十六烷基三甲基溴化铵为1.25g;然后,在60~80℃条件下用丙酮回流24小时,收集沉淀,经过洗涤、磁性分离、冷冻干燥得到氨基修饰的磁性Fe3O4纳米粒子。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述磁性Fe3O4纳米粒子按下述方法制得:
将1~5g柠檬酸钠溶于80mL乙二醇中,加入1~5g铁盐搅拌至溶解,再加入1~10g乙酸钠搅拌30分钟,将上述溶液在200℃条件下保温20小时,反应结束后水洗,醇洗,干燥得黑色磁性Fe3O4纳米粒子,所述铁盐为三氯化铁、硫酸亚铁、氢氧化铁中的一种。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述铜离子无机盐为氯化铜、硫酸铜、溴化铜中的一种或多种混合。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述氨基修饰的磁性Fe3O4纳米粒子与木瓜蛋白酶的质量比为1:0.5~1:6。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述木瓜蛋白酶溶液的浓度为0.1~
0.5mg/ml;所述氨基修饰的磁性Fe3O4纳米粒子溶液的浓度为0.5~5mM。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述铜离子无机盐溶液浓度为120~
140mM;所述磁性Fe3O4纳米粒子与铜离子无机盐溶液中铜离子的摩尔比为1:1~1:5,优选为
1:4。
7.权利要求1~6的任一项所述的方法,其特征在于:所述方法包括如下步骤:
(1)将1~5g柠檬酸钠溶于80mL乙二醇中,加入1~5g铁盐搅拌至溶解,再加入1~10g乙酸钠搅拌30分钟,将上述溶液在200℃条件下保温20小时,反应结束后水洗,醇洗,干燥得黑色磁性Fe3O4纳米粒子,所述铁盐为三氯化铁、硫酸亚铁、氢氧化铁中的一种;
(2)将300mg磁性Fe3O4纳米粒子加入100g浓度为400mmol/L的尿素水溶液中超声,然后按照摩尔比为2:10:6:14:1的比例分别加入溴化十六烷基三甲基铵、正丁醇、环己烷、正硅酸乙酯和3-氨丙基三乙氧基硅烷,搅拌均匀后在40~70℃条件下反应24小时,其中,十六烷基三甲基溴化铵为1.25g;然后,在60~80℃条件下用丙酮回流24小时,收集沉淀,经过洗涤、磁性分离、冷冻干燥得到氨基修饰的磁性Fe3O4纳米粒子;
(3)用水性溶液配制得到浓度为0.1~0.5mg/ml的木瓜蛋白酶溶液;
(4)将步骤(2)中得到的氨基修饰的磁性Fe3O4纳米粒子配制成浓度为0.5~5mM的溶液,加入到步骤(3)得到的木瓜蛋白酶溶液中,摇床震荡2小时;然后加入铜离子无机盐溶液,搅拌均匀后在20~30℃静置24~96小时,使混合液通过自组装的方式合成铁-铜复合磁性纳米花,收集沉淀,经过洗涤、磁性分离、冷冻干燥得到铁-铜复合磁性纳米花。
8.权利要求1~7任一项所述方法制得的含木瓜蛋白酶的铁-铜复合磁性纳米花,其特征在于:所述磁性纳米花磁性Fe3O4纳米粒子与木瓜蛋白酶通过氢键的吸附作用结合在一起,然后在磷酸盐缓冲液中与铜离子通过超分子组装的方式形成具有三维花状结构的含木瓜蛋白酶的铁-铜复合磁性纳米花。
9.权利要求8所述磁性脂肪酶纳米花催化材料在水解牛奶中的蛋白质的应用。