1.一种铁线莲“樱桃唇”的组培快繁方法,其特征在于,包括:步骤1:材料的选取
选取健壮、无病虫害的嫩枝条,剪取带节的茎段;
步骤2:消毒灭菌
在超净工作台上,将茎段切成带一节的0.8‑1cm长;先用无菌水冲洗1次,接着用70%酒精浸泡30秒,再用10%次氯酸钠10‑15分钟,最后用再用0.1%升汞浸泡7‑8分钟,期间要不断摇动,使其消毒均匀彻底,然后用无菌水冲洗4‑5次;
步骤3:愈伤组织诱导培养
取上述茎段,横放在诱导愈伤组织的培养基中诱导培养,15天后在茎段基部产生大量的浅绿色的愈伤组织;
诱导愈伤组织培养基:1/4改良MS+NAA 1.0mg/L+2,4‑D 0.5mg/L+6‑BA 0.5mg/L+10%香蕉泥+活性炭1g/L,改良MS培养基为:将MS培养基的大量元素KNO3的用量改为2500mg/L,用(NH4)2SO4代替了NH4NO3,用量为200mg/L,其他基本成分与MS相同,改良MS培养基中还添加了25g/L的蔗糖,7.5g/L的琼脂,pH为5.8;
步骤4:愈伤组织的增殖培养
取诱导出的愈伤组织,分成0.4‑0.6cm的小块,接种到液体浅层培养基中进行愈伤组织的增殖培养;
增殖培养基为:3/4改良MS+NAA 1.0mg/L+2,4‑D 0.5mg/L+6‑BA 0.5mg/L+活性炭1g/L;
步骤5:愈伤组织分化诱导芽的培养取愈伤组织,切成1cm的小块,接种到分化培养基中进行芽的诱导;
培养基为液体浅层培养基,配方为:3/4改良MS+6‑BA 1.5mg/L+TDZ 0.5mg/L+NAA
0.01mg/L+活性炭1.5g/L;
步骤6:无根苗的生根培养
当丛生芽长到3‑5cm,剪取枝条,接种到生根培养基中诱导生根;
生根培养基为:1/2改良MS+NAA 0.5mg/L+IBA 0.1mg/L+活性炭0.5g/L。
2.根据权利要求1所述的铁线莲“樱桃唇”的组培快繁方法,其特征在于,还包括步骤7:试管苗的驯化移栽:先将试管苗移至温室,然后取出小苗洗净根部附着的培养基,移栽到基质配比为:1份沙土、2份蛭石:2份珍珠岩:5份园土份混合基质中于自然条件下培养。
3.根据权利要求1所述的铁线莲“樱桃唇”的组培快繁方法,其特征在于,所述步骤1中,剪取茎段时每三个节为一段,剪取的茎段先在流水下冲洗3‑4个小时,然后用无菌水冲洗一次。
4.根据权利要求1所述的铁线莲“樱桃唇”的组培快繁方法,其特征在于,所述步骤4中,愈伤组织的增殖培养中增值率为2‑3倍。
5.根据权利要求2所述的铁线莲“樱桃唇”的组培快繁方法,其特征在于,所述混合基质中加入VC并用800倍的多菌灵喷洒拌匀。
6.根据权利要求5所述的铁线莲“樱桃唇”的组培快繁方法,其特征在于,所述VC加入量为2.5g/L。
7.根据权利要求1‑6所述的铁线莲“樱桃唇”的组培快繁方法,其特征在于,所述步骤5和步骤6中,温度为22‑26℃,光照强度为1500‑2000Lx,相对湿度为65‑75%。