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专利号: 2018112021473
申请人: 商丘师范学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.用于ATP检测的分裂适配体传感器,其特征在于,以硫黄素T作为指示剂和媒介体,免标记分裂ATP结合适配体作为识别元素,连接在两条分裂适配体片末端的富G序列作为信号放大器;所述富GDNA序列为GGGTTGGG 或GGGTAGGG;分裂ATP结合适配体通过三甘醇将富G序列与分裂型ATP适配体连接, 连接后的富GATP分裂型适配体DNA序列为序列表中序列1和序列2;序列表中序列1 DNA和序列2 DNA两个分裂适配体的比值为1:2,浓度分别为 0.1μM和

0.2μM;硫黄素T浓度为5μM。

2.一种如权利要求1所述的分裂适配体传感器检测ATP的方法,其特征在于,采用荧光法:在含有序列表中序列1 DNA和序列2 DNA以及硫黄素T的Tris-HCl缓冲溶液中,加入经过处理的人血清,在激发波长450 nm条件下,对其进行荧光测定:当溶液颜色由亮绿色逐渐变浅至接近无色,则该传感体系对ATP响应良好;

所述Tris-HCl缓冲溶液选pH 6.0,含 Mg2+;序列表中序列1 DNA和序列2 DNA两个分裂适配体的比值为1:2,浓度分别为 0.1μM和0.2μM。

3.一种如权利要求1所述的分裂适配体传感器检测ATP的方法,其特征在于,采用圆二色谱法:在含有序列表中序列1 DNA和序列2 DNA以及硫黄素T的Tris-HCl缓冲溶液中,进行圆二色谱测定:268nm的正峰和240nm的负峰消失,即含有ATP;

所述Tris-HCl缓冲溶液选pH 6.0,含 Mg2+。

4.一种如权利要求1所述的分裂适配体传感器检测ATP的方法,其特征在于,采用可视检测:在含有序列表中序列1 DNA和序列2 DNA以及硫黄素T的Tris-HCl缓冲溶液中,在激发波长为254nm的紫外灯激发下,看到溶液由亮绿色逐渐变浅至无色,则该传感体系对ATP响应良好;

所述Tris-HCl缓冲溶液选pH 6.0,含 Mg2+。

5.如权利要求2-4其中之一所述的分裂适配体传感器检测ATP的方法,其特征在于,所述Tris-HCl缓冲溶液选pH 6.0,30 mM Mg2+。

6.如权利要求2-4其中之一所述的分裂适配体传感器检测ATP的方法,其特征在于,硫黄素T的浓度选5μM。