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专利号: 2018111773444
申请人: 深圳市菲鹏生物制药股份有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-11-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种慢病毒的纯化方法,其特征在于,在纯化的超滤浓缩过程中使用选自蔗糖、山梨醇、麦芽糖、海藻糖和甘露醇中的至少一种的添加剂来辅助浓缩。

2.根据权利要求1所述的慢病毒的纯化方法,其特征在于,所述超滤浓缩包括以下步骤:将由慢病毒培养液上清经初级纯化得到的初级纯化液与所述添加剂混合,得到混合液;

将所述混合液超滤浓缩,得到超滤物;及

用缓冲液清洗所述超滤物,得到纯化的慢病毒。

3.根据权利要求2所述的慢病毒的纯化方法,其特征在于,所述添加剂为蔗糖,所述混合液中所述蔗糖的摩尔浓度为2.92mM~292mM;或所述添加剂为山梨醇,所述混合液中所述山梨醇的摩尔浓度为10mM~1000mM;或所述添加剂为麦芽糖,所述混合液中所述麦芽糖的摩尔浓度为10mM~1000mM;或所述添加剂为海藻糖,所述混合液中所述海藻糖的摩尔浓度为10mM~1000mM;或所述添加剂为甘露醇,所述混合液中所述甘露醇的摩尔浓度为5.5mM~

548.9mM。

4.根据权利要求2所述的慢病毒的纯化方法,其特征在于,所述添加剂为蔗糖、山梨醇、麦芽糖、海藻糖及甘露醇的混合物,所述混合液中所述蔗糖的摩尔浓度为2.92mM~233mM,所述混合液中所述麦芽糖的摩尔浓度为10mM~200mM,所述混合液中所述山梨醇的摩尔浓度为10mM~200mM,所述混合液中所述海藻糖的摩尔浓度为10mM~200mM,所述混合液中所述甘露醇的摩尔浓度为5.5mM~275mM。

5.根据权利要求2所述的慢病毒的纯化方法,其特征在于,所述将由慢病毒培养液上清经初级纯化得到的初级纯化液与所述添加剂混合,得到混合液的步骤包括:将所述添加剂加入所述初级纯化液中,混合均匀,并静置至少10min,得到所述混合液。

6.根据权利要求2所述的慢病毒的纯化方法,其特征在于,所述将所述混合液超滤浓缩的步骤包括:在4℃~28℃下,将所述混合液用超滤膜包、中空纤维膜包或超滤浓缩管浓缩。

7.根据权利要求1所述的慢病毒的纯化方法,其特征在于,所述超滤浓缩包括以下步骤:将由慢病毒培养液上清经初级纯化得到的初级纯化液超滤浓缩,得到所述超滤物;

将所述超滤物与所述添加剂混合后,得到预置换物;及

用缓冲液清洗所述预置换物,得到纯化的慢病毒。

8.根据权利要求2或7所述的慢病毒的纯化方法,其特征在于,所述缓冲液中也含有所述添加剂,所述缓冲液中所述添加剂的质量百分数为0.1%~10%。

9.根据权利要求2或7所述的慢病毒的纯化方法,其特征在于,所述由慢病毒培养液上清经初级纯化得到初级纯化液的过程包括以下步骤:将所述慢病毒培养液上清离心、过滤,得到离心液;及

将所述离心液与核酸酶混合,然后用0.8μm~0.45μm滤膜过滤,得到所述初级纯化液。

10.根据权利要求9所述的慢病毒的纯化方法,其特征在于,还包括在0.8μm~0.45μm滤膜过滤之后,将得到的滤液经离子交换层析、凝胶过滤层析、疏水层析或亲和层析以得到所述初级纯化液的步骤。