1.一种蕙兰快速繁殖育苗方法,其特征在于该方法由下述步骤组成:
(1)种子的处理
选择授粉后胚龄18~24周且发育饱满的蕙兰果荚,装入牛皮袋中阴干后埋在细沙中,在4~20℃干燥、避光处保存处理4~16周,然后将蕙兰果荚用无菌水冲洗3~5次洗去表面杂物,剥开蕙兰果荚倒出种子,在无菌条件下用体积浓度为75%的乙醇水溶液消毒处理种子0.5~3min,用无菌水冲洗3~5次,再加入体积浓度为0.1%~0.2%的升汞水溶液消毒处理5~10min,用无菌水冲洗3~5次,得到消毒处理后的种子;将消毒处理后的种子浸泡于
0.1~2.0mg/L赤霉素GA3水溶液,放入摇床中在20℃~30℃条件下振荡处理24~72h;
(2)播种与培养
在无菌条件下将步骤(1)中处理好的种子与赤霉素GA3水溶液混合物播种到无菌萌发培养基上,放置于20~30℃、光照强度3000lx、光照8h/天的人工智能培养箱内培养;
上述无菌萌发培养基是:以MS培养基为基础培养基,加入0.1~2.0mg/L萘乙酸、0.1~
2.0mg/L 6-苄氨基腺嘌呤、2~10g/L活性炭,调整pH至5.5~6.5,115~121℃高压灭菌15~
25min,在培养基冷却到40~60℃时加入0.1~2.0mg/L赤霉素GA3混匀,冷却凝固;
(3)幼苗的转接培养
选取株高为1~3cm、长出2~3片真叶且根系发育完整的蕙兰幼苗,在超净工作台上转接至转接培养基上,置于温度为25±2℃、光照强度2000~3000lx、光照12h/天的人工智能培养箱内培养;
上述的转接培养基是:以MS培养基为基础培养基,加入0.1~2.0mg/L萘乙酸、0.1~
2.0mg/L 6-苄氨基腺嘌呤、30~100mL/L香蕉汁,调整pH至5.5~6.5,121℃高压灭菌20min,冷却凝固;
(4)种苗的驯化与移栽
将转接培养8~12周的蕙兰种苗放入驯化室驯化3~7周后,取出蕙兰种苗,用清水清洗蕙兰种苗根系周围培养基后放在避光处阴干3~6小时至蕙兰种苗根系表面发白;然后将蕙兰种苗移栽至12~20cm厚的移栽基质中,移栽时将3~7苗栽入同一穴中,穴深5~10cm,填埋后在移栽基质表面放置一层松树皮,用水浇透后放置于温室中生长,并在上方搭建拱形支架,盖薄膜保湿;
上述的移栽基质由腐殖质、发酵过的树皮粉、珍珠岩按体积比为1:3~6:0.3~0.7配制。
2.根据权利要求1所述的蕙兰快速繁殖育苗方法,其特征在于:步骤(1)中,在无菌条件下用体积浓度为75%的乙醇水溶液消毒处理种子0.75~1min,用无菌水冲洗3~5次,再加入体积浓度为0.1%~0.2%的升汞水溶液消毒处理7~8min,用无菌水冲洗3~5次,得到消毒处理后的种子。
3.根据权利要求1或2所述的蕙兰快速繁殖育苗方法,其特征在于:步骤(1)中,将消毒处理后的种子浸泡于0.5~1.5mg/L赤霉素GA3水溶液,放入摇床中在20℃~30℃条件下振荡处理36~48h。
4.根据权利要求1所述的蕙兰快速繁殖育苗方法,其特征在于:步骤(2)中,所述的无菌萌发培养基是:以MS培养基为基础培养基,加入0.5~1.0mg/L萘乙酸、0.5~1.5mg/L 6-苄氨基腺嘌呤、3~5g/L活性炭,调整pH至5.8~6.0,121℃高压灭菌20min,在培养基冷却到45~50℃时加入0.5~1.0mg/L赤霉素GA3混匀,冷却凝固。
5.根据权利要求1所述的蕙兰快速繁殖育苗方法,其特征在于:步骤(3)中,所述的转接培养基是:以MS培养基为基础培养基,加入0.5~1.0mg/L萘乙酸、0.5~1.5mg/L 6-苄氨基腺嘌呤、50~70mL/L香蕉汁,调整pH至5.5~6.5,121℃高压灭菌20min,冷却凝固。
6.根据权利要求1所述的蕙兰快速繁殖育苗方法,其特征在于:步骤(4)中,所述的移栽基质为腐殖质、发酵过的树皮粉、珍珠岩按体积比为1:5:0.5配制。