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专利号: 2018109128456
申请人: 云南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种大豆疫霉菌的产孢培养方法,其特征在于,所述方法包括:(1)菌种的活化:将大豆疫霉接种于V8培养基上,光暗交替培养6-8d;

(2)从步骤(1)中经过活化所得的V8培养基大豆疫霉菌平板中沿菌落边缘打取菌丝块,把菌丝块挑入装有10%液体V8培养基的培养瓶中,黑暗培养46-50h;

(3)将步骤(2)培养得到的菌丝块,挑入新的培养皿中,并用无菌去离子水冲洗菌丝块,直至菌丝块发白,菌丝充分展布开即可;

(4)游动孢子囊的产生及释放:向步骤(3)中冲洗后的菌丝块中加入土壤浸提液,黑暗培养12-15h。

2.根据权利要求1所述的产孢培养方法,其特征在于,所述10%液体V8培养基按照如下成分的体积与质量关系等比例制成:将100ml V8汁离心去除沉淀,吸取上清液,加入1.4g CaCO3,加去离子水定容至1L。

3.根据权利要求1所述的产孢培养方法,其特征在于,所述土壤浸提液按照如下成分的体积与质量关系等比例制成:土壤40-60g,加水,过滤后加水补足到1L。

4.根据权利要求1-3任一项所述的产孢培养方法,其特征在于,步骤(2)在温度为24-26℃,转速为120-160rpm的条件下采用摇瓶培养。

5.根据权利要求4所述的产孢培养方法,其特征在于,步骤(2)在温度为25℃,转速为

140rpm的条件下采用摇瓶培养。

6.根据权利要求4所述的产孢培养方法,其特征在于,步骤(1)中,所述光暗交替培养为光照12h,黑暗12h。

7.根据权利要求4所述的产孢培养方法,其特征在于,步骤(2)中,沿菌落边缘打孔取菌丝块。

8.根据权利要求1-7任意一项所述的产孢培养方法,其特征在于,培养过程的温度控制为24-26℃,优选25℃。

9.根据权利要求1-8任意一项所述的产孢培养方法,其特征在于,大豆疫霉菌的产孢量可达2×105个/mL。