利索能及
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专利号: 2018106612423
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-03-02
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种重组钝齿棒杆菌(Corynebacteriumcrenatum),其特征在于,是以钝齿棒杆菌为宿主,以质粒pDXW10为表达载体,表达来源Serratia marcecens JNB5‑1的N‑乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶;编码所述来源Serratia marcecens JNB5‑1的N‑乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.构建权利要求1所述重组钝齿棒杆菌的方法,其特征在于,是将编码所述来源Serratia marcecens JNB5‑1的N‑乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶的基因用EcoR I、Sac I双酶切后,回收基因片段后,与线性化pDXW10连接后转化入钝齿棒杆菌,得到重组菌。

3.应用权利要求1所述重组钝齿棒杆菌生产L‑鸟氨酸的方法,其特征在于,是将重组钝齿棒杆菌的种子液接种于发酵培养基中进行发酵培养,发酵温度为28 31℃,搅拌转速为~

500 600 r/min。

~

4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,是将种子液按6 %接种于发酵培养基中进行发酵培养,发酵温度为28 31℃,搅拌转速为500 600 r/min,发酵过程中,温度与搅拌转~ ~速由发酵罐自动控制,pH通过补加50%氨水维持稳定。

5.根据权利要求3或4所述的方法,其特征在于,所述发酵培养基的成分为:葡萄糖 200 g/L,硫酸铵 40 g/L,酵母提取物 12 g/L,七水合硫酸镁 0.5 g/L,氯化钾 1 g/L,磷酸二氢钾1.5 g/L,七水合硫酸亚铁 0.02 g/L,一水合硫酸锰0.02 g/L,0.05mM L‑精氨酸,pH 

7.0。

6.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述种子液的制备方法是从活化平板上挑取单菌落接种于含卡那霉素的BHI培养基中,30℃振荡培养24 h,然后全部转接于种子培养基中,30℃培养24 h,种子培养基组成:葡萄糖 50 g/L,硫酸铵 20 g/L,酵母提取物 12 g/L,七水合硫酸镁 0.5 g/L,磷酸二氢钾1.5 g/L,去离子水配制,pH 7.0。

7.权利要求1所述重组钝齿棒杆菌在生产L‑鸟氨酸中的应用。