欢迎来到利索能及~ 联系电话:18621327849
利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2018103645707
申请人: 齐鲁工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-10-29
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种制备谷胱甘肽合成酶系的方法,其特征为,包括以下步骤:

(1)将产谷胱甘肽合成酶系的微生物培养,得细胞培养液,离心,制得菌体细胞,将菌体细胞重悬于去离子水中,制得细胞质量百分比浓度为25~35wt%的溶液,破碎细胞,得到细胞破碎液;

(2)在20~30℃下配制乳酸钠水溶液,将聚丙二醇加入到乳酸钠溶液中,在总体系中使聚丙二醇的质量百分比浓度为20~30wt%、乳酸钠的质量百分比浓度为15~25wt%,混合均匀,制得聚丙二醇/乳酸钠双水相体系溶液;

(3)将步骤(1)制得的细胞破碎液与步骤(2)制得的聚丙二醇/乳酸钠双水相体系溶液按体积比(1~2):1混合均匀,静置分相,制得乳酸钠下相溶液和含有谷胱甘肽合成酶系的聚丙二醇上相溶液;

(4)向步骤(3)制得的聚丙二醇上相溶液中加入乳酸钠,使乳酸钠在总体系中的质量浓度为8~12wt%,混合均匀,静置分相,制得乳酸钠下相溶液和含有谷胱甘肽合成酶系的聚丙二醇上相溶液;

(5)向步骤(4)制得的聚丙二醇上相溶液中加入乳酸钠,使乳酸钠在总体系中的质量浓度为6~10wt%,调溶液pH值为7.5~8.5,混合均匀,静置分相,制得含有谷胱甘肽合成酶系的乳酸钠下相溶液和聚丙二醇上相溶液;

(6)用超滤膜对步骤(5)制得的乳酸钠溶液过滤,收集截留液,冷冻干燥,制得谷胱甘肽合成酶系产品;

所述步骤(2)、(3)、(4)、(5)中的聚丙二醇的数均分子量为500。

2.根据权利要求1所述的制备谷胱甘肽合成酶系的方法,其特征在于,步骤(1)中,破碎细胞采用高压匀浆机,工作压力为50~60MPa、温度为5~10℃。

3.根据权利要求1所述的制备谷胱甘肽合成酶系的方法,其特征在于,步骤(6)中,超滤膜的截留分子量为40000~50000Dal,工作压力为0.1~0.2MPa、温度为20~25℃。