1.具有促进细胞增殖活性的丝胶-琼脂糖复合凝胶的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:利用转人FGF1基因与人FGF2基因蚕丝提取重组FGF1蛋白与FGF2蛋白的丝胶蛋白,得含有重组FGF1蛋白与FGF2蛋白的丝胶蛋白溶液,然后经复性后得复性的含有重组FGF1蛋白与FGF2蛋白的丝胶蛋白溶液,再与琼脂糖溶液混合,注模,成型,得具有促进细胞增殖活性的丝胶-琼脂糖复合凝胶;
所述提取为将转人FGF1基因与人FGF2基因蚕丝经过液氮研磨成粉末,加水制成30 50 ~mg/mL 的浓度,利用含有8M尿素的抽提缓冲液在80℃条件下萃取2h,然后于4℃条件下,18,
000 rpm条件下离心10min,上清液即为含有重组FGF1蛋白与FGF2蛋白的丝胶蛋白溶液;所述抽提缓冲液为pH 7.0、含50mM Tris-HCl和8M 尿素的溶液;
所述复性为将含有重组FGF1蛋白与FGF2蛋白的丝胶蛋白在透析液中、4 ℃透析上清液
12 h,然后利用对半稀释法用复性液对透析液进行置换,重复4次,每次12h,再用水透析去除复性液,最后将复性的含有重组FGF1蛋白与FGF2蛋白的丝胶蛋白溶液在4 ℃、4000rpm 条件下离心10 min,收集沉淀即可;
所述琼脂糖溶液的质量分数为1%。
2.根据权利要求1所述具有促进细胞增殖活性的丝胶-琼脂糖复合凝胶的制备方法,其特征在于:所述复性的含有重组FGF1蛋白与FGF2蛋白的丝胶蛋白溶液与所述琼脂糖溶液混合后复性的含有重组FGF1蛋白与FGF2蛋白的丝胶蛋白溶液的质量分数为20 100%。
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3.根据权利要求2所述具有促进细胞增殖活性的丝胶-琼脂糖复合凝胶的制备方法,其特征在于:所述复性的含有重组FGF1蛋白与FGF2蛋白的丝胶蛋白溶液与所述琼脂糖溶液混合后复性的含有重组FGF1蛋白与FGF2蛋白的丝胶蛋白溶液的质量分数为60 80%。
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4.由权利要求1 3任一项所述的制备方法制得的具有促进细胞增殖活性的丝胶-琼脂~糖复合凝胶。