1.一种制备虎奶菇菌核糖蛋白的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1) 将干燥的虎奶菇菌核粉碎、过筛,将过筛后的菌核粉末用乙酸乙酯脱脂,过滤,向滤渣中继续加入丙酮,继续脱脂,过滤,滤渣干燥后,即得脱脂后的虎奶菇菌核粉末;
(2) 将脱脂后的菌核粉末分散到3%-5%质量浓度的NaCl溶液中,料液比1 g:8-10 mL,搅拌提取,提取结束后过滤除去滤液,水洗滤渣,以除去游离蛋白质和多糖成分;
(3) 将水洗后的滤渣以pH6.0-8.0的Tris-HCl缓冲液反复浸提,浸提结束后合并所得浸提液并过滤以除去不溶性残渣,得到糖蛋白粗提液,将所得粗提液进行浓缩;
(4)向经步骤(3)浓缩后的提取液中加入浓缩液1倍体积的95%乙醇,静置,过滤除去沉淀物;再向上清液中继续加入浓缩提取液2-4倍体积的95%乙醇,静置,弃去上清液,将沉淀物以水溶解后放入透析袋透析,透析后将透析袋中截留的液体进行冷冻干燥,即得虎奶菇菌核糖蛋白;
步骤(3)中,将水洗后的滤渣以pH6.0-8.0的Tris-HCl缓冲液浸提,浸提所用温度为75-
95℃,滤渣与缓冲液的料液比为1 g:10-15 mL,提取时间1-2 h,浸提过程重复3次,结束后合并所得浸提液并过滤以除去不溶性残渣,得到糖蛋白粗提液。
2.根据权利要求1所述的一种制备虎奶菇菌核糖蛋白的方法,其特征在于,步骤(1)中,将过筛后的菌核粉末用5-10倍量的乙酸乙酯搅拌脱脂1-3h,过滤,向滤渣中继续加入3-5倍量的丙酮,搅拌脱脂1-3h,过滤,滤渣干燥后即得脱脂后的虎奶菇菌核粉末。
3.根据权利要求1所述的一种制备虎奶菇菌核糖蛋白的方法,其特征在于,步骤(2)中,搅拌提取结束后过滤除去滤液,并用去离子水将滤渣洗涤3-5次,以除去游离蛋白质和多糖成分。
4.根据权利要求1所述的一种制备虎奶菇菌核糖蛋白的方法,其特征在于,步骤(3)中,将所得粗提液进行加热减压浓缩,采用温度不高于65℃,真空度不低于0.085 MPa。
5.根据权利要求1或4所述的一种制备虎奶菇菌核糖蛋白的方法,其特征在于,步骤(3)中,将所得粗提液的体积浓缩至原体积的1/4-1/10。
6.根据权利要求1所述的一种制备虎奶菇菌核糖蛋白的方法,其特征在于,步骤(4)中,透析袋的截流量为3500 Da。
7.根据权利要求1所述的一种制备虎奶菇菌核糖蛋白的方法,其特征在于,步骤(4)中,将经过二次醇沉后得到的沉淀物以水溶解后加入截流量3500 Da的透析袋中,去离子水透析间歇更换去离子水,透析后将透析袋中截留的液体进行冷冻干燥,即得虎奶菇菌核糖蛋白。