1.一种双生物光学窗口靶向纳米生物探针,其特征在于该生物探针基于双光子吸收近红外发射的阳离子型水溶性共轭聚合物和带相反电荷的靶向生物分子组成,所述的双生物光学窗口为650-1000nm;该探针中阳离子型水溶性共轭聚合物的共轭主链作为疏水部分,带相反电荷的靶向生物分子作为亲水部分,两者通过静电、疏水作用结合后自组装,形成由亲水外壳和疏水内核组成的纳米粒子。
2.根据权利要求1所述的双生物光学窗口靶向纳米生物探针,其特征在于所述的阳离子型水溶性共轭聚合物具有如下分子式:其中,9位取代的芴基为电子给体,简称D,烯键为共轭桥,窄带隙的芳香杂环Ar为电子受体,简称A,得到一种共轭主链为D-π-A的结构;聚合度n为大于1的自然数,R,R’选自下列基团:R1R2R3R4N+;这里R1,R2,R3,R4,分别为烷基、烷氧基中的一种。
3.根据权利要求2所述的双生物光学窗口靶向纳米生物探针,其特征在于所述的Ar为
4,7-双(噻吩-2基)-2,1,3-苯并噻二唑基团或4,7-双(噻吩-2基)-2,1,3-苯并硒二唑基团中的一种。
4.根据权利要求1或2所述的双生物光学窗口靶向纳米生物探针,其特征在于:所述的阳离子型水溶性共轭聚合物,a.当Ar为4,7-双(噻吩-2基)-2,1,3-苯并噻二唑基团时,其中一种典型的结构如下:R和R’均位于芴基的9位上,R和R’的结构都是R1R2R3R4N+,R1为烷氧基,R2、R3和R4均为烷基;其结构式如下:b.当Ar为4,7-双(噻吩-2基)-2,1,3-苯并硒二唑基团时,其中一种典型的结构如下:R和R’均位于芴基的9位上,R和R’的结构都是R1R2R3R4N+,R1为烷氧基,R2、R3和R4均为烷基。其结构式如下:
5.一种如权利要求1所述的双生物光学窗口靶向纳米生物探针的制备方法,其特征在于该制备方法为纳米沉淀法:将阳离子型水溶性共轭聚合物溶解在能和水混溶的极性有机溶剂中,然后将溶液在超声状态下迅速加入到带相反电荷的肿瘤靶向生物分子水溶液中,室温搅拌一段时间后静置,以形成稳定的分散的纳米粒子,再通过挥发法或透析法除去极性有机溶剂,冷冻干燥除去水,最后得到靶向纳米生物探针。
6.根据权利要求5所述的双生物光学窗口靶向纳米生物探针的制备方法,其特征在于,所述阳离子型水溶性共轭聚合物的制备方法为:
1)采用有机金属催化的Heck聚合反应,通过A+B双组分交替共聚的方法先合成中性共轭聚合物,其中,A为二烯基芴衍生物单体,B为窄带隙的二溴芳香杂环单体;
2)由步骤1)制备得到的中性共轭聚合物再通过季铵化反应得到双生物光学窗口阳离子型水溶性共轭聚合物。
7.一种如权利要求1所述的一种双生物光学窗口靶向纳米生物探针的应用,其特征在于所述的靶向纳米生物探针应用在肿瘤靶向双光子荧光细胞成像中,该应用方法包括以下步骤:
1)制备双光子吸收近红外发射的阳离子型水溶性共轭聚合物;
2)将上述阳离子型水溶性共轭聚合物与带相反电荷的靶向生物分子结合,制备靶向纳米生物探针;
3)将上述靶向纳米生物探针用于激光共聚焦双光子荧光成像,实现肿瘤靶向双生物光学窗口双光子荧光细胞成像。