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专利号: 2017112198125
申请人: 保定佑安生物科技有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-10-22
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种用于检测运动基因SNP的引物组,其特征在于,所述引物组包括1个引物对和5个探针组,所述5个探针组包括:用于检测AMPD1基因的探针组、用于检测PPARGC1A基因的探针组、用于检测ACTN3基因的探针组、用于检测NRF-1基因的探针组和用于检测COL5A1基因的探针组;

所述引物对包括

BIP:5’-cgacagcagaggatttgttgtgtggaagcttgagcgga-3’(SEQ ID NO.1);

FIP:5’-FAM-atcgtcgtgactgaaagtgcggggctctgtcctattac-3’(SEQ ID NO.2);

所述用于检测AMPD1基因的探针组包括

AMPD1-A:

5’-tttctcttcagctgtatgaattttatcgtcgtgactgtttgtaataggacagagccccgcactttcagtcacg acgat-3’(SEQ ID NO.3);

AMPD1-wt-B:

5’-cgacagcagaggatttgttgtgtggaagcttgagcggattttcctctgctgtcgttttttttaaagtaatgca atactcacg-3’(SEQ ID NO.4);

AMPD1-mut-B:

5’-cgacagcagaggatttgttgtgtggaagcttgagcggattttcctctgctgtcgttttttttttaaagtaatgc aatactcaca-3’(SEQ ID NO.5);

所述用于检测PPARGC1A基因的探针组包括

PPARG-A:

5’-ggtcttgtctgcttcgtcgtttttatcgtcgtgactgtttgtaataggacagagccccgcactttcagtcacg acgat-3’(SEQ ID NO.6);

PPARG-wt-B:

5’-cgacagcagaggatttgttgtgtggaagcttgagcggattttcctctgctgtcgtttttttttttttcactgtcc ctcagttcact-3’(SEQ ID NO.7);

PPARG-mut-B:

5’-cgacagcagaggatttgttgtgtggaagcttgagcggattttcctctgctgtcgtttttttttttttttcactgtc cctcagttcacc-3’(SEQ ID NO.8);

所述用于检测ACTN3基因的探针组包括

ACTN3-A:

5’-phosphate-gtcagcctcgggcagtgttg-tttt-atcgtcgtgactg-ttt-gtaataggacagagccc cgcac-ttt-cagtcacgacgat-3’(SEQ ID NO.9);

ACTN3-wt-B:

5’-cgacagcagaggatttgttgtgtggaagcttgagcggattttcctctgctgtcgttttatgatggcacctcg ctctcg-3’(SEQ ID NO.10);

ACTN3-mut-B:

5’-cgacagcagaggatttgttgtgtggaagcttgagcggattttcctctgctgtcgttttttatgatggcacct cgctctca-3’(SEQ ID NO.11);

所述用于检测NRF-1基因的探针组包括

NRF1-A:

5’-tgagtaccagctgaatggcattttatcgtcgtgactgtttgtaataggacagagccccgcactttcagtca cgacgat-3’(SEQ ID NO.12);

NRF1-wt-B:

5’-cgacagcagaggatttgttgtgtggaagcttgagcggattttcctctgctgtcgttttttttttttttttgcctct tctctcctggtggt-3’(SEQ ID NO.13);

NRF1-mut-B:

5’-cgacagcagaggatttgttgtgtggaagcttgagcggattttcctctgctgtcgttttttttttttttttttgcct cttctctcctggtggc-3’(SEQ ID NO.14);

所述用于检测COL5A1基因的探针组包括

COL5A1-A:

5’-tgggtgtggacagagcgtggttttatcgtcgtgactgtttgtaataggacagagccccgcactttcagtc acgacgat-3’(SEQ ID NO.15);

COL5A1-wt-B

5’-cgacagcagaggatttgttgtgtggaagcttgagcggattttcctctgctgtcgttttttttttttttttttttggc cccgctcccggggcgcg-3’(SEQ ID NO.16);

COL5A-mut-B:

5’-cgacagcagaggatttgttgtgtggaagcttgagcggattttcctctgctgtcgttttttttttttttttttttttg gccccgctcccggggcgca-3’(SEQ ID NO.17)。

2.如权利要求1所述的引物组在检测运动基因SNP中的应用。

3.如权利要求1所述的引物组在制备用于检测运动基因SNP的产品中的应用。

4.一种用于检测运动基因SNP的产品,其特征在于,所述产品包括权利要求1所述的引物组。

5.一种运动基因SNP的多重检测方法,其特征在于,所述方法应用权利要求1所述的引物组或权利要求4所述的产品。

6.根据权利要求5所述的多重检测方法,其特征在于,所述方法包括:先以所述探针组为引物,以待测样本DNA为模板,鲑鱼精DNA为封闭剂,进行连接反应,得到连接产物;接着以所述连接产物为模板,以所述引物对为引物进行扩增反应,得到扩增产物;然后将所述扩增产物进行酶切;最后通过毛细管电泳进行结果分析。

7.根据权利要求6所述的多重检测方法,其特征在于,所述连接反应温度为65-69℃,所述探针组浓度为4pmol/L-0.4nmol/L,所述鲑鱼精DNA的用量为1-3μg。

8.根据权利要求6所述的多重检测方法,其特征在于,所述扩增反应时间为65-75min。

9.根据权利要求6所述的多重检测方法,其特征在于,所述毛细管电泳步骤中所用的扩增产物预先稀释5-20倍后上样检测。

10.权利要求5-9任一项所述的多重检测方法在运动基因SNP检测中的应用。