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专利号: 2017110428527
申请人: 湖南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种利用茶叶愈伤组织悬浮培养提取制备花青素的方法,其特征在于,该方法包括如下步骤:A、选生长旺盛的茶树,取新梢上第3片展开叶,灭菌后切成小块;

B、将切得的小块叶片转入愈伤组织培养基中培养,每2周更换一次愈伤组织培养基;其中,愈伤组织培养基的组成为:2.2g/L MS盐+0.05-0.2mg/L噻苯隆+0.05-0.10mg/L吲哚丁酸+0.10-0.20mg/L赤霉素+20.0g/L蔗糖+6g/L琼脂粉,培养条件为:21℃,10小时光照、14小时黑暗,光照强度1200lux,相对湿度70-85%;

C、待培养出现红色愈伤组织并长到体积为0.8-1.2立方厘米时,将其切碎成边长为

0.08-0.12毫米的小方块,按愈伤组织:悬浮培养基为1:100的体积比,将愈伤组织转入悬浮培养基中振动培养4周;其中,悬浮培养基的组成为:4.4g/L MS盐+0.05-0.2mg/L噻苯隆+

0.05-0.10mg/L吲哚丁酸+0.10-0.20mg/L赤霉素+25.0g/L蔗糖,培养条件为:29℃,16小时光照、8小时黑暗,光照强度3000lux,相对湿度为70-85%,振动速度100-110rpm;

D、悬浮培养后,转入诱导培养基中震荡培养1周;其中,诱导培养基的组成为:1.1g/L MS盐+0.12mg/L噻苯隆+0.08mg/L吲哚丁酸+15.0g/L蔗糖+0.8-1.2g/L二氢杨梅素;培养条件为:20℃,12小时光照、12小时黑暗,光照强度4000lux,相对湿度70-85%,振动速度90-

100rpm;

E、诱导培养后收集悬浮培养细胞,干燥后粉碎至100mu,然后于悬浮培养细胞中加入

0.7-1.5%体积浓度的盐酸乙醇溶液于55-65℃超声提取2-3次,每次提取条件为:超声功率

200-300w,时间30-50min,每1g悬浮培养细胞加20-50ml盐酸乙醇溶液;合并提取液,真空浓缩直至溶剂全部挥干,得到花青素产品。

2.如权利要求1所述的利用茶叶愈伤组织悬浮培养提取制备花青素的方法,其特征在于,所述步骤A中的茶树品种为尖波黄、碧香早或福鼎大白。

3.如权利要求1所述的利用茶叶愈伤组织悬浮培养提取制备花青素的方法,其特征在于,所述步骤A中的灭菌是指将茶叶以1%体积浓度的次氯酸钠水溶液浸泡18-20min,取出,用灭菌水冲洗干净后用无菌风吹干,无菌条件下将叶片切成小块。