1.一种分析铜离子比色荧光探针,其为吡啶甲酸酯类化合物,其结构如式1所示:式1
上式中:R1,R2,R3,R4,R5,R6,R7,R8为氢原子、碳原子数1-3直链或支链烷基、碳原子数
1-3的直链或支链烷氧基、磺酸基、酯基、羧基。
2.根据权利要求1所述的比色荧光探针,其特征在于,结构如式2所示:式2。
3.一种权利要求2所述的比色荧光探针的制备方法,其特征在于采用以下步骤:式3 式4 式5将式3所示的2-吡啶甲酸溶于二氯甲烷中,再加入式4所示的对羟基苯甲醛,二者摩尔比是2:1,在4-二甲氨基吡啶和N,N'-二环己基碳酰亚胺的催化作用下,常温搅拌5h,然后进行抽滤,得到纯品式5;
式6 式7 式8将式6所示的3-OH-3-CH3-2丁酮溶于吡啶,加2-3滴乙酸,再加入式7所示的丙二腈,二者的摩尔比为1:2,在25℃油浴中反应24h,然后进行抽滤,得到纯品式8;
式5 式8 式2 将式5所示的2-吡啶甲酸酯溶于无水乙醇,再加入式8所示的腈,二者的摩尔比是1:1~
1:2,在哌嗪的催化作用下,常温搅拌10 15h,然后进行抽滤,得到粗产品式2;如果要得到较~纯的产品,可以利用硅胶柱层析法,将滤饼用二氯甲烷和甲醇的混合体系进行提纯得到纯品。
4.一种权利要求1或2所述比色荧光探针在制备用于检测样本中铜离子浓度的制剂中的应用。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:
首先配制探针储备液:称量5 mg的式2加入到比色管中,加入1mL的二氯甲烷,摇匀,使探针溶解,再用无水乙醇定容到10 mL,配制成1 mM的探针储备液;
然后,移取50 µL的探针储备液放进10 mL比色管中,加入4-6mL蒸馏水,然后加入0.5 mL的pH为 7.4的4-羟乙基哌嗪乙磺酸,再用蒸馏水定容到10mL,移取50 µL铜离子溶液加入比色管内;摇匀,20 min后,用荧光分光光度计,测定荧光光谱。
6.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:
首先配制探针储备液:首先配制探针储备液:称量5 mg的式2加入到比色管中,加入1mL的二氯甲烷,摇匀,使探针溶解,再用无水乙醇定容到10 mL,配制成1 mM的探针储备液;
然后,移取50 µL的探针储备液放进10 mL比色管中,加入4-6mL蒸馏水,然后加入0.5 mL的pH为 7.4的4-羟乙基哌嗪乙磺酸,再用蒸馏水定容到10mL,移取50 µL铜离子溶液加入比色管内;摇匀,20 min后,用紫外-可见分光光度计,测定吸收光谱。