利索能及
我要发布
收藏
专利号: 2017106941784
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-08-25
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法,其特征在于,所述制备方法步骤如下:第一步,MePEG-Peptide-Tri-CL的制备

(1)Tri-CL的合成

将1,2,3-丙烷三甲酸和ε-己内酯按比例加入到25mL三口烧瓶中,120℃-140℃下溶解后,在氮气保护下,加入一定量的辛酸亚锡,密封,120℃-140℃反应9.5-48h,产物趁热溶于适量二氯甲烷中,滴加至冰乙醚中,过滤得到的沉淀,25℃下干燥24h;所述1,2,3-丙烷三甲酸、ε-己内酯、辛酸亚锡的投料物质的量之比为1∶20~80∶0.05~0.40;

(2)Tri-CL-NHBoc的合成

取Tri-CL溶于适量甲苯中,加入N-(叔丁氧羰基)乙醇胺,氮气保护下,加入一定量的三乙胺,密闭,30~60℃下反应12~60h,得到Tri-CL-NHBoc,将反应混合物逐滴滴加到冰甲醇中,6000r/min离心30min,除去上清液,所得沉淀于25℃下真空干燥24h;所述Tri-CL、N-(叔丁氧羰基)乙醇胺、三乙胺的投料物质的量之比为1∶3~6∶2~8;

(3)Tri-CL-NH2的合成

取Tri-CL-NHBoc溶于适量二氯甲烷中,加入三氟乙酸,氮气保护,在室温下搅拌反应4~10h,将反应液用质量分数5%KHCO3水溶液萃取三次,合并下层有机相,蒸馏水洗涤三次,合并有机相加入一定量无水MgSO4干燥,搅拌过夜,次日过滤除去MgSO4固体,滤液滴加到冰甲醇中,6000r/min离心30min,除去上清液,所得沉淀于25℃真空干燥;所述Tri-CL-NHBoc和TFA投料物质的量之比为1∶3~6;

(4)MePEG-COOH的合成

MePEG和丁二酸酐按比例投入50mL三口烧瓶中,加入适量吡啶搅拌直到全部溶解,在氮气保护下,快速加入一定比例的4-二甲氨基吡啶、三乙胺,密封后室温反应12~48h,反应液逐滴滴加到适量冰乙醚中,过滤,得到的沉淀为MePEG-COOH,沉淀于25℃真空干燥24h;所述MePEG分子量范围为350~5000,所述MePEG、丁二酸酐、DMAP和TEA投料物质的量之比为1∶1~3∶0.2~0.8∶0.5~2;

(5)MePEG-NHS的合成

MePEG-COOH和N-羟基琥珀酰亚胺按比例加入50ml三口烧瓶中,加入适量的乙腈溶解,再加入一定量N,N-二环己基碳二亚胺(DCC),室温反应12~48h,将反应液滴加到适量冰乙醚中,过滤得到的滤饼即为产物,产物于25℃真空干燥24h;所述MePEG-COOH、N-羟基琥珀酰亚胺和DCC投料物质的量之比为1∶2~6∶0.1~3;

(6)MePEG-Peptide的合成

将适量DMAP和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)加入25mL三口烧瓶中,用少量乙腈:水混合溶液溶解,将50mgpeptide溶于少量乙腈:水混合溶液,加入反应瓶中,氮气保护下在冰浴下搅拌,活化2小时,2小时后,移去冰浴,MePEG-NHS溶于适量乙腈中,投入反应瓶中,氮气保护,室温下反应48~96h,反应液冷冻干燥,所得固体为产物;所述活化过程DMAP、EDC和Peptide投料物质的量之比为5~20∶5~20∶1;

所述MePEG-NHS和peptide投料物质的量之比为1∶1~2;

所述乙腈∶水混合溶液的比值为10∶1~1∶10;所述Peptide为XGPLGIAGQr9X;

(7)MePEG-Peptide-Tri-CL的合成

称取MePEG-Peptide加入到25mL三口烧瓶中,加入适量二氯甲烷溶解,适量DCC和DMAP溶于适量二氯甲烷后加入到反应瓶中,氮气保护,冰浴下活化2小时,2小时后,将适量Tri-CL-NH2溶于适量二氯甲烷中,投入到反应瓶,氮气保护,室温下反应48~96h,反应液装入截留分子量14000的透析袋中,前5小时,每一小时换一次纯化水,之后,每隔2小时换一次纯化水,透析结束后,冷冻干燥得到产物;所述MePEG-Peptide、Tri-CL-NH2、DCC和DMAP投料物质的量之比为2.29:0.57:17.18:17.18;

第二步,纳米粒的制备

以姜黄素为模型药物,将MePEG-Peptide-Tri-CL和姜黄素溶于丙酮为脂相溶液,将表面活性剂溶于水中为水相,按不同的脂相/水相比将脂相慢慢滴入水相,持续搅拌,形成载姜黄素-星状纳米粒原液,将制得的纳米粒溶液真空抽滤1h除去有机溶剂,6000r/min离心

20min后,获得纳米粒溶液,所述姜黄素、MePEG-Peptide-Tri-CL的质量比为1∶5~100,所述表面活性剂为P-188。

2.如权利要求1所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法,其特征在于,所述二氯甲烷/冰乙醚体积比为1∶5~1∶20;

所述二氯甲烷的体积用量以所述ε-己内酯的质量计为1~10mL/g;

所述冰乙醚的体积用量以所述ε-己内酯的质量计为10~100mL/g;

GPC检测Tri-CL分子量范围在8262.27~18665.83。

3.如权利要求1所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法,其特征在于,所述Tri-CL的甲苯浓度为0.09~0.12g/mL;

所述冰甲醇的体积用量以所述Tri-CL的质量计为20~200mL/g。

4.如权利要求1所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法,其特征在于,所述Tri-CL-NHBoc二氯甲烷溶液浓度范围为0.5~1.0g/mL;

所述合并有机相与冰甲醇体积比范围为1∶5~1∶20;

GPC检测Tri-CL-NH2分子量范围在10000~18000。

5.如权利要求1所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法,其特征在于,所述MePEG吡啶溶液浓度范围为0.02~0.80g/mL;

所述反应液/冰乙醚体积比范围为1∶5~1∶20。

6.如权利要求1所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法,其特征在于,所述MePEG-COOH乙腈溶液浓度范围为6.4×10-3~0.6g/mL;所述反应液/冰乙醚体积比范围在1∶5~1∶20。

7.如权利要求1所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法,其特征在于,所述MePEG-NHS乙腈溶液浓度为2×10-3~0.08g/mL;

GPC检测MePEG-Peptide分子量范围在为2800~7800。

8.如权利要求1所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法,其特征在于,所述MePEG-Peptide二氯甲烷溶液浓度为2×10-3~0.02g/mL;

GPC检测MePEG-Peptide分子量范围在17000~22000。

9.如权利要求1所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法,其特征在于,所述星状给药纳米粒的平均粒径100~300nm,多分散指数小于0.3,包封率大于70%;

所述姜黄素的质量用量以有机溶剂的体积计为0.6~1.6mg/mL;

所述表面活性剂的质量用量以水的体积计为0.5~3.0mg/mL;

所述脂相/水相体积比为1∶5~30。

10.如权利要求9所述一种具有酶靶向性的星状给药纳米粒的制备方法,其特征在于,所述表面活性剂为P-188;

所述姜黄素、MePEG-Peptide-Tri-CL的质量比为1∶20~50;

所述姜黄素的质量用量以有机溶剂的体积计为0.8~1.2mg/mL;

所述表面活性剂的质量用量以水的体积计为1~2mg/mL;

所述脂相/水相体积比为1∶15~20。