1.一种皮肤干细胞活性素的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、胎盘间充质干细胞的分离:取临床正常剖宫产的新鲜胎盘组织,无菌条件下分离胎盘中部内层组织剪成1cm×1cm×1cm的大小,用400-600u/ml的青霉素浸泡10-30min,用4℃D-Hank’s液冲洗3遍,用胰蛋白酶0.1-0.2g/mL和胶原蛋白酶0.05-0.08g/mL于37℃下消化
30-60min,200目过滤网过滤收集组织细胞,红细胞裂解液4℃水浴3-5min去除红细胞即得;
S2、胎盘间充质干细胞的接种培养与诱导分化:将步骤S1得到的胎盘间充质干细胞接种在皮肤干细胞培养基中,于37℃、5%CO2、培养箱中孵育15-25h,弃去培养基,重新加入新鲜的皮肤干细胞培养基中,待皮肤干细胞接近80-90%融合时,进行传代扩增培养;
S3、皮肤干细胞活性素的制备:将步骤S2中接种在皮肤干细胞培养基中的胎盘间充质干细胞扩增5-10代,收集培养上清液,将上清液用0.22μm的无菌过滤器过滤,合并滤液即得。
2.根据权利要求1所述的皮肤干细胞活性素的制备方法,其特征在于,步骤S1所述的皮肤干细胞培养基包括以下组分及其浓度:基础培养基12-15mL、胰岛素15-25mg/L、L-谷氨酰胺2-8mg/L、表皮生长因子6-10μg/L、成纤维细胞生长因子1-3μg/L、神经生长因子0.85-0.9μg/L、糖皮质激素100-250μg/L、柠檬酸铁铵0.5-1.5mg/L、硝酸铁0.4-0.6mg/L、EDTA-2Na
4-8mg/L、虾青素4-6mg/L、黄芩甙元0.08-0.12mg/L、飞燕草素20-50μg/L和桑色素2-4ng/L。
3.根据权利要求2所述的皮肤干细胞活性素的制备方法,其特征在于,所述的皮肤干细胞培养基由以下组分及其浓度组成:基础培养基13.5mL、胰岛素20mg/L、L-谷氨酰胺5mg/L、表皮生长因子8μg/L、成纤维细胞生长因子2μg/L、神经生长因子0.88μg/L、糖皮质激素175μg/L、柠檬酸铁铵1mg/L、硝酸铁0.5mg/L、EDTA-2Na 6mg/L、虾青素5mg/L、黄芩甙元0.1mg/L、飞燕草素35μg/L和桑色素3ng/L。
4.根据权利要求2或3所述的皮肤干细胞活性素的制备方法,其特征在于,所述的基础培养基为DMEM/F12培养基。
5.根据权利要求1-4任一项所述的皮肤干细胞活性素的制备方法制备的皮肤干细胞活性素在霜剂化妆品中的用途。
6.根据权利要求5所述的用途,其特征在于,所述的霜剂化妆品包括以下组分及其质量百分比:皮肤干细胞活性素10-15%、羊毛醇2-5%、白蜂蜡5-10%、银耳多糖0.2-0.4%、SOD4-
6%、肌肽2-4%、壳寡糖1-3%、L-苹果酸2-5%、蜂胶2-4%和水47.6-71.8%。
7.根据权利要求6所述的用途,其特征在于,所述的霜剂化妆品由以下组分及其质量百分比组成:皮肤干细胞活性素12.5%、羊毛醇3.5%、白蜂蜡7.5%、银耳多糖0.3%、SOD5%、肌肽
3%、壳寡糖2%、L-苹果酸3.5%、蜂胶3%和水59.7%。