1.一种观察水稻根尖微管横纹排列方式的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将样品使用4wt%的多聚甲醛固定液固定20-40min,放入PBS中浸泡3-5min;
2)将步骤1)浸泡后的样品取出、制成标样,将所述标样用封闭液室温封闭50-60min,所述标样的封闭方法为将标样放到装有封闭液的离心管中并保证完全覆盖;
3)将步骤2)所得样品取出、用PBS浸泡3-5min,更换PBS浸泡液,重复浸泡3-5次,3-
5min/次;然后使用tubulin一抗35-40℃避光孵育1-3hrs;
4)将步骤3)避光处理的样品取出,用PBS浸泡3-5min,更换PBS浸泡液,重复浸泡3-5次,
3-5min/次;然后使用标记荧光的二抗35-40℃避光孵育1-3hrs;
5)将步骤4)避光处理的样品取出,用PBS浸泡3-5min、取出,将样品置于载玻片上,使用荧光抗淬灭封片剂封片,Confocal观察并拍照。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1)中所述样品为取1/2MS平板培养基生长4天的新鲜水稻,将根部洗净,自根部末端向基部方向取样,样品长度为0.5cm。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2)中所述标样的制备方法为使用琼脂糖包埋根尖样品,使用双面刀片将样品沿根尖中央均等切分成2份。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2)中所述标样的制备方法为使用琼脂糖包埋根尖样品,借助震动切片机将样品沿纵轴切割成厚度为80-100微米薄片。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2)中所述封闭液为包含BSA和Triton X100的PBS,PBS中所含BSA的质量百分数是2wt%,所含Triton X100的质量百分数是1wt%。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤4)中所述二抗为Alexa Fluor 488标记山羊抗小鼠IgG(H+L)。