利索能及
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专利号: 201710116597X
申请人: 临沂大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-04-09
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种多功能磁性DNA纳米球,其特征在于,所述多功能磁性DNA纳米球包括结合有磁珠的DNA纳米球,其制备方法如下:(1)构建反应体系,进行DNA链的环化和连接,得到结合了磁珠的环状DNA;所述反应体系包括:磷酸化的线性DNA模板单链、DNA引物单链I、T4 DNA连接酶、D-PBS溶液和磁珠溶液,所述磷酸化的线性DNA模板单链的序列如SEQ ID NO.1所示,所述DNA引物单链I为多聚(T)DNA引物单链或修饰生物素分子的DNA引物单链,多聚(T)DNA引物单链的序列如SEQ ID NO.2所示,修饰生物素分子的DNA引物单链的序列如SEQ ID NO.3所示;

(2)将结合了磁珠的环状DNA与phi29 DNA聚合酶和dNTP溶液混合,进行滚环扩增反应,即得结合有磁珠的DNA纳米球。

2.根据权利要求1所述的多功能磁性DNA纳米球,其特征在于,步骤(1)中,所述反应体系中,磷酸化的线性DNA模板单链和DNA引物单链的浓度为80-120μM;T4 DNA连接酶的浓度为1800-2200U/μL。

3.根据权利要求2所述的多功能磁性DNA纳米球,其特征在于,步骤(1)中,所述反应体系中,磷酸化的线性DNA模板单链和DNA引物单链的浓度为100μM;T4 DNA连接酶的浓度为

2000U/μL。

4.一种多功能磁性DNA纳米球,其特征在于,所述多功能磁性DNA纳米球包括含双硫键的结合有磁珠的DNA纳米球,其制备方法如下:(1)构建反应体系,进行DNA链的环化和滚环扩增反应,得到滚环扩增产物;所述反应体系包括:磷酸化的线性DNA模板单链、DNA引物单链I、T4 DNA连接酶、D-PBS溶液、phi29 DNA聚合酶和dNTPs,所述磷酸化的线性DNA模板单链的序列如SEQ ID NO.1所示;所述DNA引物单链I为多聚(T)DNA引物单链或修饰生物素分子的DNA引物单链,修饰生物素分子的DNA引物单链的序列如SEQ ID NO.3所示,所述多聚(T)DNA引物单链的序列如SEQ ID NO.2所示;

(2)将链霉亲和素磁珠与DNA引物单链II混合反应,然后与滚环扩增产物反应形成含双硫键的结合磁珠的DNA纳米球,所述DNA引物单链II为修饰双硫键及生物素分子的DNA引物单链,其序列如SEQ ID NO.4所示。

5.权利要求1-4任一项所述的多功能磁性DNA纳米球在制备对CEM细胞的靶向给药系统中的应用。

6.权利要求4所述的多功能磁性DNA纳米球在制备检测细胞内巯基化合物的试剂中的应用。