1.一种四甲基吡嗪的提取纯化方法,包括步骤如下:
(1)将发酵液升温至70-80℃,离心分离菌体,得上清液;将上清液维持温度70-80℃进行活性碳脱色;
(2)将脱色后的上清液过滤,得到四甲基吡嗪透析液;
(3)将四甲基吡嗪透析液过滤后再经反渗透滤膜浓缩,得渗透液;
(4)将渗透液进行冷却结晶,降温至10-15℃时,离心分离四甲基吡嗪晶体,然后再将四甲基吡嗪晶体于70-90℃溶解后进行冷却重结晶,离心分离,得到高纯度四甲基吡嗪。
2.根据权利要求1所述的四甲基吡嗪的提取纯化方法,其特征在于,步骤(1)中将发酵液升温所用设备为管式换热器。
3.根据权利要求1所述的四甲基吡嗪的提取纯化方法,其特征在于,步骤(1)中离心分离菌体所用设备为离心机,离心转速为7000-10000转/分钟。
4.根据权利要求1所述的四甲基吡嗪的提取纯化方法,其特征在于,步骤(1)中脱色过程是采用活性炭密封脱色;
优选的,活性碳用量为上清液体积的1-1.5%;
优选的,脱色过程的压力为0.1-0.2MPa,脱色时间为20-40min。
5.根据权利要求1所述的四甲基吡嗪的提取纯化方法,其特征在于,步骤(1)中脱色后调整pH为7.0-8.0。
6.根据权利要求1所述的四甲基吡嗪的提取纯化方法,其特征在于,步骤(2)中过滤过程为:先用板框过滤器过滤,然后进行超滤去除杂质蛋白,最后进行纳滤进一步去除杂质。
7.根据权利要求6所述的四甲基吡嗪的提取纯化方法,其特征在于,步骤(2)中板框过滤器过滤时,在板框过滤器中铺设硅藻土,所述的硅藻土为粒径在28-68μm的粗硅藻土与粒径在0.02-2μm的细硅藻土按3:1质量比的混合。
8.根据权利要求6所述的四甲基吡嗪的提取纯化方法,其特征在于,步骤(2)中超滤过程的超滤膜截留分子量为1000Dalton;
优选的,纳滤过程的纳滤膜截留分子量为200Dalton。
9.根据权利要求1所述的四甲基吡嗪的提取纯化方法,其特征在于,步骤(3)中浓缩的温度为60-70℃,浓缩前溶液为浓缩后溶液体积的2.5-3倍,反渗透浓缩后取浓缩相进行降温结晶,反渗透膜最大操作压力不超过0.8MPa。
10.根据权利要求1所述的四甲基吡嗪的提取纯化方法,其特征在于,步骤(4)中降温速度以5-10℃/h降温,直至结晶析出。