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专利号: 2016100042395
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-08-30
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种强启动子,其特征在于,所述强启动子是将启动子PP43和/或启动子PHpaII进行n次串联,其中n≥1。

2.根据权利要求1所述的强启动子,其特征在于,所述启动子的核苷酸序列是SEQ ID NO.1至SEQ ID NO.10中的任意一种。

3.根据权利要求1所述的强启动子,其特征在于,所述启动子是以下任意一种:(1)将启动子PP43和/或启动子PHpaII进行一次串联,形成序列如SEQ ID NO.1的启动子PP43-PHpaII、序列如SEQ ID NO.2的启动子PHpaII-PP43、序列如SEQ ID NO.3的启动子PHpaII-PHpaII,或者序列如SEQ ID NO.4所示的启动子PP43-PP43;

(2)将启动子PP43和/或启动子PHpaII进行两次串联,形成序列如SEQ ID NO.5的启动子PHpaII-PHpaII-PP43;序列如SEQ ID NO.6的启动子PP43-PP43-PP43;序列如SEQ ID NO.7的启动子PHpaII-PHpaII-PHpaII;序列如SEQ ID NO.8的启动子PP43-PHpaII-PP43;序列如SEQ ID NO.9的启动子PHpaII-PP43-PHpaII;序列如SEQ ID NO.10的启动子PP43-PP43-PHpaII;

(3)将启动子PP43和启动子PHpaII进行三次或者三次以上的串联。

4.含有权利要求1所述强启动子的质粒载体。

5.含有权利要求4所述质粒载体的基因工程菌。

6.权利要求1所述强启动子在提高外源蛋白表达方面的应用。

7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述外源蛋白为纳豆激酶或氨肽酶。

8.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述外源蛋白的表达是在枯草芽孢杆菌中进行。

9.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述应用,是将外源蛋白编码基因克隆到pMA0911质粒上,然后用核苷酸序列为SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:10的任一启动子代替pMA0911质粒上原有的启动子,得到含有重组表达质粒,然后将重组表达质粒转化到枯草芽孢杆菌中得到重组菌,再用重组菌发酵培养表达。

10.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述发酵培养表达使用的表达培养基为:

1-5%胰蛋白胨、1-5%酵母提取物、0.1-5%甘油、17mM KH2PO4、72mM K2HPO4,并添加了

0.02-0.08%氯化钙。