1.一种由双孢蘑菇罐头加工废水中提取纯化的活性多糖Abnp1001,其特征在于:它的单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖以及半乳糖,且阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖以及半乳糖的摩尔比为39.4:10.3:3.9:17.2:27.4。
2.一种由双孢蘑菇罐头加工废水中提取纯化的活性多糖Abnp1002,其特征在于:它的单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖以及葡萄糖,且阿拉伯糖、木糖、甘露糖以及葡萄糖的摩尔比为0.13:0.56:1.57:87.1。
3.一种活性多糖的提取纯化工艺,其特征在于:它包括以下工艺步骤:
(1)材料预处理:收集蘑菇罐头加工过程中产生的工业废水,然后对该工业废水进行旋转蒸发浓缩,浓缩至溶液折光率达到35~55%,得到蘑菇预煮浓缩液;量取单位体积的蘑菇预煮浓缩液,在蘑菇预煮浓缩液中加入等体积的去离子水进行混合,混合后在65-75℃水浴条件下将蘑菇预煮浓缩液中析出的晶体完全溶解,溶解之后离心机离心,离心机的转速控制在11500-12500rpm之间,离心温度为15-25℃,离心时间为10-20min,离心之后取上清液,上清液用90-150KDa的超滤膜超滤,将超滤得到的截留液,按体积比为1:3.5-1:2.5的比例加入乙醇,在室温下醇沉过夜,醇沉得到的沉淀用50~100ml去离子水溶解,并于
65-75℃减压蒸馏除去乙醇,再次离心机离心,离心机的转速控制在11500-12500rpm之间,离心温度为15-25℃,离心时间为10-20min,收集上清液,即得到不小于100KDa的粗多糖Abcp,采用苯酚-硫酸法测Abcp的多糖含量,3.5-5℃保存备用;
(2)离子交换柱层析:
a.DEAE-52预处理:将DEAE-52进行酸、碱预处理;
b.经柱层析得Abnp100;
(3)Abnp100的Sephadex G-200凝胶柱层析:
a.Sephadex G-200预处理;
b.经柱层析得活性多糖。
4.根据权利要求3所述的活性多糖的提取纯化工艺,其特征在于:步骤(2)中DEAE-52预处理的具体过程为:在DEAE-52中加入蒸馏水,浸泡过夜后抽滤,先用0.45-0.55mol/L的NaOH-NaCl碱洗,用蒸馏水洗至中性;用0.45-0.55mol/L的HCl酸洗,用蒸馏水洗至中性;
用0.45-0.55mol/L的NaOH-NaCl浸泡,最后用蒸馏水洗至中性即可。
5.根据权利要求3所述的活性多糖的提取纯化工艺,其特征在于:步骤(2)的b工艺具体为:将预处理后的DEAE-52进行沸水浴脱气,脱气时间为10-20min,脱气之后冷却装柱,用0.015-0.025mol/L、pH为7.1-7.3的Tris-HCl缓冲液洗至分层明显,之后注入DEAE-Sephadex-A50,将层析柱连接到组合紫外检测仪和HW-2000色谱工作站,定时为5~
20min/管,用0.015-0.025mol/L,pH为7.1-7.3Tris-HCl缓冲液洗平衡后上Abcp,待Abcp进入DEAE-52的界面时,开始平衡洗脱,先用0.015-0.025mol/L,pH为7.1-7.3的Tris-HCl缓冲液洗脱平衡,收集主峰A的洗脱液,用4.5-5.5KDa超滤膜超滤主峰A的洗脱液,将超滤得到的截留液进行离心机离心,离心机的转速控制在11500-12500rpm之间,离心温度为
15-25℃,离心时间为10-20min,收集上清液,此即为中性粗多糖Abnp100。
6.根据权利要求3所述的活性多糖的提取纯化工艺,其特征在于:步骤(3)中所述的Sephadex G-200预处理的具体工艺为:将Sephadex G-200干胶浸泡在蒸馏水中,不断搅拌,放置于室温下膨胀45-50h,并除去表面的碎片和沉降缓慢的细小颗粒,之后利用真空干燥器除尽凝胶液中的空气。
7.根据权利要求3所述的活性多糖的提取纯化工艺,其特征在于:步骤(3)的b工艺具体为:将预处理后的Sephadex G-200填入层析柱中,将层析柱连接到组合紫外检测仪和HW-2000色谱工作站,用去离子水洗平衡,平衡后使液面降至填料界面时上样品Abnp100,待样品完全进入填料界面时用0.015-0.025mol/L的NaCl溶液洗脱,控制流速为
0.15-0.250mL/min,分部收集,每5~20min收集1管,每管的量是2~10mL,用苯酚-硫酸法测各管多糖浓度,根据所测得数据,绘制成多糖含量分布图,根据多糖含量分布图与洗脱谱图,收集主峰C的洗脱液,合并主峰C的洗脱液,对主峰C的洗脱液用4.5-5.5KDa超滤膜进行超滤到9-11mL,进行冷冻真空干燥后,得多糖纯品Abnp1001。
8.根据权利要求3所述的活性多糖的提取纯化工艺,其特征在于:步骤(3)的b工艺具体为:将预处理后的Sephadex G-200填入层析柱中,将层析柱连接到组合紫外检测仪和HW-2000色谱工作站,用去离子水洗平衡,平衡后使液面降至填料界面时上样品Abnp100,待样品完全进入填料界面时用0.015-0.025mol/L的NaCl溶液洗脱,控制流速为
0.15-0.250mL/min,分部收集,每5~20min收集1管,每管的量是2~10mL,用苯酚-硫酸法测各管多糖浓度,根据所测得数据,绘制成多糖含量分布图,根据多糖含量分布图与洗脱谱图,收集主峰D的洗脱液,合并主峰D的洗脱液,对主峰D的洗脱液用4.5-5.5KDa超滤膜进行超滤到9-11mL,进行冷冻真空干燥后,得多糖纯品Abnp1002。
9.根据权利要求3或5所述的活性多糖的提取纯化工艺,其特征在于:步骤(2)的b步骤中:所选用的层析柱为2.6cm×50cm层析柱,DEAE-52填料填的高度为柱高的2/5-3/5,填入DEAE-Sephadex-A50的高度为8-11cm,Abcp的上样量为5-10毫升。
10.根据权利要求3或7或8所述的活性多糖的提取纯化工艺,其特征在于:步骤(3)的b步骤中:所选用的层析柱为2.6cm×50cm层析柱,SephadexG-200填入的高度为
35-45cm,Abnp100的上样量分别为为5-10毫升。
11.根据权利要求1所述的活性多糖Abnp1001的应用,其特征在于:在制备治疗急性肝损伤药物以及抗肿瘤药物中的应用。
12.根据权利要求1所述的活性多糖Abnp1002的应用,其特征在于:在制备治疗急性肝损伤药物以及抗肿瘤药物中的应用。