利索能及
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专利号: 2015101948487
申请人: 南京晓庄学院
专利类型:发明专利
专利状态:无效专利
更新日期:2025-08-18
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种青鸟寿的组织培养方法,其特征在于,包括如下步骤:

1)以青鸟寿肉质叶片作为外植体,充分清洗后备用;

2)将清洗后的青鸟寿外植体杀菌消毒,然后用手术刀将较大的外植体以45°斜口切至长1.5-2cm,再将切分后的外植体切口向上斜插到启动培养基中,培养温度25±2℃,光照时间为24h/d,光照度为2000lx,培养7d以上;启动培养基配方为MS+琼脂7g/L+蔗糖30g/L;

3)7d后青鸟寿外植体叶肉逐渐膨大,此时将外植体转入诱导愈伤培养基培养,20天后外植体形成黄绿色的疏松的小球状的愈伤组织;诱导愈伤培养基配方为MS+NAA0.1~

0.4mg/L+6-BA1.0~2.5mg/L+KT 0.01~0.03mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L;培养条件为:25+2℃,每天光照8~12h/d,光照强度为2000~4000lx,以20~30天为周期更换培养基;

4)将愈伤组织转入分化培养基中培养,35天愈伤组织逐渐变转成淡绿色,在淡绿色愈伤上萌动分化出芽点,50天后转入芽增殖培养基中增殖成小芽,丛生芽逐渐形成丛生苗,并长出小青鸟寿;分化培养基配方为:MS+NAA0.1~0.2mg/L+6-BA 0.1~0.5mg/L+KT 0.01~

0.02mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L;芽增殖培养基为MS+NAA0.05~0.1mg/L+6-BA0.05~

0.5mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L;培养条件为:25+2℃,每天光照8~12h/d,光照强度为2000~4000lx,以20~30天为周期更换培养基;

5)壮苗和移栽:将已生根瓶苗或未生根的瓶苗转移到人工气侯室中进行炼苗,控制相对湿度为85%~95%,温度为25℃~30℃,10天后洗净移栽到育苗钵中,进行移栽管理即可。

2.根据权利要求1所述的青鸟寿的组织培养方法,其特征在于:步骤1)中,利用棉线将选取的青鸟寿外植株叶片剥离成单个叶片,先用洗衣粉清洗青鸟寿叶片,清洗完后倒去洗涤液,然后将经过洗衣粉清洗的叶片在自来水下冲洗30分钟后,将叶片放于4℃过夜,次日将叶片置于流水下冲洗2小时。

3.根据权利要求1所述的青鸟寿的组织培养方法,其特征在于:步骤2)中,将清洗后的青鸟寿外植体,放置在超净工作台的烧杯中用浓度为75%的酒精浸泡30s,浸泡后再用无菌水冲洗2-3次,然后迅速将青鸟寿培养部位倒入浓度为0.1%升汞液中浸泡8-10min,将升汞消毒后的外植体用无菌水洗涤3-4次,每次3-5min,确保外植体表面的升汞被洗净为止。

4.根据权利要求1所述的青鸟寿的组织培养方法,其特征在于:步骤2)中,将切分后的外植体切口向上斜插到启动培养基中,每瓶培养基中接2-3个外植体。