利索能及
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专利号: 2014106071693
申请人: 上海应用技术学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-10-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种液质联用定量检测小鼠体内S-构型利伐沙班及R-构型利伐沙班药物浓度的方法,其特征在于具体包括如下步骤:(1)、样品预处理

采用液液萃取的方法,以二氯甲烷作萃取剂,取50μL小鼠血浆样品,加150μL二氯甲烷,涡旋震荡10s,以10000r/min转速,离心分离10min,用移液枪移取下层清液于1.5mL离心管中,用N2吹干,用50μL乙腈超声溶解后进液质分析;所述的血浆样品是小鼠灌胃给药溶液后的血浆;所述的给药溶液是浓度分别为1.0mg/mL利伐沙班消旋体溶液和S-构型利伐沙班溶液;给药溶液配制所用的溶剂是由乙醇、分子量为400的聚乙二醇和水的体积比例为20:60:

20组成的混合溶液;

(2)、液相分析方法

所用的仪器,高效液相色谱仪为Waters公司的ACQUITY UPLC;

液相色谱柱:CHIRALPAK IC 250mm*4.6mm 5μm;

流动相:按体积百分比计算,由乙腈:水:甲酸为97%:3%:0.1%的比例组成的混合溶剂,单通道等度洗脱;

流速:0.9mL/min;

柱温:室温;

进样量:20μL;

检测波长:全波段扫描;

采用柱后分流的方法,液相流速为0.9mL/min,进质谱流速为0.3mL/min;

(3)、质谱分析方法

所用的仪器,质谱仪为Waters公司的Quattro Premier XE,采用高纯液氮经汽化所得的氮气作为碰撞气、雾化气、辅助气、锥孔气,并维持系统的真空状态;

质谱过程控制参数如下:

采用ESI正离子扫描模式进行多反应监测,锥孔电压35.0V;毛细管电压3.28kv;离子源温度115℃;去溶剂温度400℃;去溶剂气流量600L/hr;锥孔气流量50L/hr,定量离子对为

436.0/144.9;

(4)、采用外标法定量,使用峰面积计算出血浆中S-构型利伐沙班及R-构型利伐沙班药物浓度。