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专利号: 2014102740566
申请人: 宿州学院
专利类型:发明专利
专利状态:无效专利
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种2-甲基-L-色氨酸的酶法转化制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)将具有色氨酸合成酶活性的菌株在培养基中培养发酵,发酵液离心后得到含色氨酸合成酶的湿菌体;

(2)将上述湿菌体中加入转化液,所述转换液中包括:含L-丝氨酸的料液,磷酸吡哆醛和2-甲基吲哚,乙醚、甲醇、乙醇、丙酮中的一种;在20~50℃,pH 5~12条件下进行酶促反应,等电点结晶法分离得到2-甲基-L-色氨酸。

2.根据权利要求1所述的一种2-甲基-L-色氨酸的酶法转化制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中,具有色氨酸合成酶活性的菌株选自大肠杆菌ATCC15489、铜绿假单胞菌CGMCC NO:1.1129、施氏假单胞菌CGMCC NO:1.202、枯草芽孢杆菌CGMCC NO:1.1628中的一种。

3.根据权利要求1所述的一种2-甲基-L-色氨酸的酶法转化制备方法,其特征在于,所述步骤(1)中,培养基成分包括10~40g/L碳源物质、5~35g/L氮源物质、2.5g/L柠檬酸、3.0g/L硫酸铵、6.0g/L K2HPO4、2.0g/L MgSO4、0.05g/L CaCl2、0.003g/L CoCl2、0.0001g/L MnC4H6O4·4H2O,碳源物质采用葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、果糖中的一种或多种,氮源物质采用牛肉膏、酵母膏、玉米浆、蛋白胨、豆饼水解液中的一种或多种。

4.根据权利要求1所述的一种2-甲基-L-色氨酸的酶法转化制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,所述含L-丝氨酸的料液中L-丝氨酸的浓度为0.5~40.5g/L。

5.根据权利要求4所述的一种2-甲基-L-色氨酸的酶法转化制备方法,其特征在于,所述含L-丝氨酸的料液来源于毛发酸水解液或纯L-丝氨酸液;毛发酸水解液中总氨基酸的重量百分比为5%~45%,其中L-丝氨酸在总氨基酸中的重量百分比为10%~90%。

6.根据权利要求1所述的一种2-甲基-L-色氨酸的酶法转化制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,所述的乙醚、甲醇、乙醇或丙酮,其浓度为0.001g/L~4.0g/L。

7.根据权利要求1所述的一种2-甲基-L-色氨酸的酶法转化制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,磷酸吡哆醛的浓度为0.2~0.8g/L,2-甲基吲哚的浓度为26.2~104.8g/L。

8.根据权利要求1所述的一种2-甲基-L-色氨酸的酶法转化制备方法,其特征在于,所述步骤(2)中,等电点结晶法的具体方法如下:将酶促反应后的转化液3000~5000r/min离心10~20min,去除菌体细胞;加热转化液,采用活性碳脱色,抽滤,滤液调至pH 5~6,静置析出沉淀,真空抽滤,烘干得2-甲基-L-色氨酸粗品,采用乙醇洗涤,真空抽滤,烘干得2-甲基-L-色氨酸精品。