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专利号: 2013103545621
申请人: 湖南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2025-10-14
缴费截止日期: 暂无
联系人

摘要:

权利要求书:

1.一种博落回体细胞胚胎发生和植株再生的方法,其特征在于,包括如下步骤:

1)外植体的取材与消毒:取未开放的博落回花蕾消毒后;将花蕾轻轻拨开,拔取花丝,切除花药,作为外植体,备用;

2)胚性愈伤组织诱导培养:将步骤1)消毒的花丝外植体接种到MS+2,4-D0.5mg/L+6-BA0.5mg/L培养基上;在温度25±1℃,光照强度1000-3000Lx,光照时间16~18h/d的条件下进行胚性愈伤诱导培养,培养30~40d后得到胚性愈伤组织;

3)体细胞胚胎诱导培养:将步骤2)得到的胚性愈伤组织转接到MS+GA30.5mg/L培养基上,在温度25±1℃,光照强度1000-3000Lx,光照时间16-18h/d的条件下进行胚状体诱导培养,20天后形成胚状体或芽;

4)体细胞胚胎萌发与成苗培养:将步骤3)得到的胚状体或芽转接到MS培养基上,在温度25±1℃,光照强度1000-3000Lx,光照时间16-18h/d的条件下培养15~30天形成生根的完整植株;

5)再生苗的移栽与培养:将生根苗,移栽到泥炭土:木质泥炭土:椰糠粉:蛭石=

1:1:1:1的炼苗基质中,浇透水,并用塑料小棚罩住小苗,保证棚内湿度不低于80%,在温度25±1℃,光照强度为3000lx下培养,小苗适应培养环境两周后,移除塑料棚,进行正常的水肥管理。

2.根据权利要求1所述的博落回体细胞胚胎发生和植株再生的方法,其特征在于,步骤1)所述的外植体的取材与消毒过程具体为:取未开放的博落回花蕾,用蒸馏水清洗,在超净工作台上用无菌水冲洗干净;用70%酒精浸泡10s,再用0.1%升汞溶液浸泡8~

10min消毒灭菌后用无菌水冲洗3~4次;将花蕾轻轻拨开,拔取花丝,切除花药,作为外植体,备用。

3.根据权利要求1所述的博落回体细胞胚胎发生和植株再生的方法,其特征在于,将步骤3)得到的胚状体或芽在温度25±1℃,光照强度1000-3000Lx,光照时间16-18h/d的条件下进行增殖培养10~15天,增殖培养基为:MS+GA30.5mg/L。