1.猪细小病毒基因工程疫苗的制备方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)根据猪细小病毒VP2基因序列,构建重组酵母载体pGAPZαA-VP2;
(2)将线性化的重组酵母载体pGAPZαA-VP2电击转化酵母菌株SMD1168,筛选高拷贝的重组酵母工程菌,鉴定;
(3)将鉴定的阳性重组酵母工程菌进行发酵培养,表达猪细小病毒主要结构蛋白VP2;
(4)对表达的结构蛋白进行纯化,加佐剂,制得猪细小病毒基因工程疫苗。
2.根据权利要求1所述猪细小病毒基因工程疫苗的制备方法,其特征在于步骤(2)所述筛选高拷贝的重组酵母工程菌是将线性化的重组酵母载体pGAPZαA-VP2电击转化酵母菌株SMD1168后,分别涂布于含100μL、150μL、200μL Zeocin(100mg/ml)抗性的YPDS平板,于30℃恒温培养箱中倒置避光培养2~3天,待白色的单菌落长出,即筛选出不同Zeocin抗性浓度下的高拷贝重组酵母工程菌。
3.根据权利要求1所述猪细小病毒基因工程疫苗的制备方法,其特征在于所述佐剂为纳米佐剂。