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专利号: 2010105676718
申请人: 连云港市农业科学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-06-16
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种洋葱组织培养的方法,其特征在于,其步骤如下:(1)将收获的新鲜洋葱球置于4-5℃环境中冷藏3-4周;

(2)将冷藏后的洋葱球剥除外皮至直径为2-3cm,然后对它进行消毒处理,消毒后用无菌水冲洗干净;

(3)在无菌条件下将消毒处理后的洋葱球切除至鳞茎盘为1-2mm厚、贴近鳞茎盘的鳞茎的长、宽各为4-5mm、高为0.5-1mm的外植体,再用刀片在鳞茎上表面做“井”字形划痕,然后将外植体接种到洋葱增殖培养基I或II中;

(4)经过20-30天的培养,获得已长出若干个侧芽的无菌材料;然后按下述方法对无菌材料进行扩繁:将无菌材料置于消毒好的培养皿中,再将侧芽从鳞茎上切下或掰下并转到洋葱增殖培养基III或IV中培养20-30天,获得已长出丛生芽的无菌材料,其后每20-30天就可扩繁一次;当扩繁过程中出现玻璃化现象时,则使用增殖培养基V或VI进行培养;

扩繁过程中,含多效唑的增殖培养基不连续使用,含间苯三酚的增殖培养基不连续使用;

(5)将扩繁得到的洋葱单株壮苗转入生根培养基中进行培养,培养温度为20-25℃,培养至洋葱生根后,打开培养器皿的封口,再继续培养1-2天后将洋葱苗从培养器皿中取出,洗净根部附着的培养基,移入装有沙土的盆中,于自然光照条件下,白天22-25℃、夜间

11-15℃的条件下培养20-30天,得成活洋葱苗;

所述的洋葱增殖培养基I是由以下重量配比的原料组成:单位:mg/l,花宝3号 3000-4000;6-BA 4-7;

NAA 0.1-0.6; 蔗糖 30000;

琼脂8000; 其余为纯净水;pH为5.8;

所述的洋葱增殖培养基III除含有洋葱增殖培养基I中所述的重量配比的全部原料外,还含有重量配比为0.2-0.5的多效唑;其pH为5.8;

所述的洋葱增殖培养基V除含有洋葱增殖培养基I中所述的重量配比的全部原料外,还含有重量配比为0.2-0.5的间苯三酚;其pH为5.8;

所述的洋葱增殖培养基II是由以下重量配比的原料组成:单位:mg/l,NH4NO3 1600-1700; KNO3 1800-1900;

KH2PO3 170-180; CaCl2·2H2O 400-450;

MgSO4·7H2O 350-380;FeSO4·7H2O 26-28;

Na2-EDTA 35-40; MnSO4·4H2O 20-25;

ZnSO4·7H2O 7-10; H3BO3 5-7;

KI 0.5-1; Na2MoO4·2H2O 0.2-0.3;

CuSO4·5H2O 0.02-0.03;CoCl2·6H2O 0.02-0.03;

肌醇 88-100; 甘氨酸 2-5;

盐酸硫胺素 0.3-0.5; 盐酸吡哆素 0.3-0.5;

烟酸 0.3-0.5; 6-BA 4-7;

NAA 0.1-0.6; 蔗糖 30000;

琼脂 8000; 其余为纯净水;pH为5.8;

所述的洋葱增殖培养基IV除含有洋葱增殖培养基II中所述的重量配比的全部原料外,还含有重量配比为0.2-0.5的多效唑;其pH为5.8;

所述的洋葱增殖培养基VI除含有洋葱增殖培养基II中所述的重量配比的全部原料外,还含有重量配比为0.2-0.5的间苯三酚;其pH为5.8;

洋葱生根培养基是由以下重量配比的原料组成:单位:mg/l,NH4NO3 800-850; KNO3 900-950;

KH2PO3 85-90; CaCl2·2H2O 200-225;

MgSO4·7H2O 175-190; FeSO4·7H2O 26-28;

Na2-EDTA 35-40; MnSO4·4H2O 20-25;

ZnSO4·7H2O 7-10; H3BO3 5-7;

KI 0.5-1; Na2MoO4·2H2O 0.2-0.3;

CuSO4·5H2O 0.02-0.03;CoCl2·6H2O 0.02-0.03;

肌醇 88-100; 甘氨酸 2-5;

盐酸硫胺素 0.3-0.5; 盐酸吡哆素 0.3-0.5;

烟酸 0.3-0.5; IBA 1-2;

NAA 0.01-0.06; 蔗糖 30000;

琼脂 8000; 其余为纯净水;pH 5.8。

2.根据权利要求1所述的洋葱组织培养的方法,其特征在于:步骤(2)所述的消毒采用下述方法:在无菌条件下取洋葱球用75%以上的酒精摇晃浸泡30-60秒,再用质量百分比为0.1%的升汞溶液摇晃浸泡10-15分钟。