本发明公开了环指蛋白130(RING finger protein 130，RNF130)在治疗钙化性主动脉瓣疾病中的应用，属于生物医药技术领域。本发明具体涉及RNF130及靶向敲降瓣膜细胞中RNF130基因的shRNA在制备抗钙化性主动脉瓣疾病(calcific aortic valve disease,CAVD)药物中的应用。本发明发现RNF130在CAVD病人主动脉瓣中有明显钙化病变，且RNF130表达显著升高，而RNF130的shRNA能有效逆转钙化培养基诱导的hVICs成骨样表型转换和钙沉积，表明RNF130具有成为治疗CAVD的制药靶点的潜在功能。

本发明涉生物技术领域，具体指涉及一种具有皮肤紫外线损伤修复功效的金枪鱼鱼鳞寡肽及其制备方法和应用；本发明以金枪鱼鱼鳞为原料，通过预处理、复合酶解，膜超滤、色谱分离纯化得到具有皮肤紫外线损伤修复功效的寡肽Tyr‑Ser‑Gly‑Pro‑Leu‑Gly‑Ile‑Arg(YSGPLGIR)，ESI‑MS测定分子量为862.0Da。本发明制备的具有皮肤紫外线损伤修复功效的寡肽YSGPLGIR可显著提高紫外线损伤小鼠成纤维细胞(NIH 3T3)的存活率和抗氧化酶活力，可应用于制备治疗皮肤紫外线损伤相关的药物和保健品。

本发明涉及蛋白质提取技术领域，为解决日本黄姑鱼加工过程中产生大量的副产物，资源利用率低的问题，提供一种生物源二肽基肽酶‑IV抑制剂的制备方法，包括以下步骤：(1)将日本黄姑鱼鱼皮预处理得鱼皮粉，然后将鱼皮粉提取胶原蛋白，离心干燥，得日本黄姑鱼鱼皮胶原蛋白；(2)利用复合酶对步骤(1)得到的日本黄姑鱼鱼皮胶原蛋白进行酶解，得日本黄姑鱼鱼皮胶原肽；(3)将日本黄姑鱼鱼皮胶原肽通过二肽基肽酶筛选试剂盒筛选，即得生物源二肽基肽酶‑IV抑制剂。本发明以日本黄姑鱼鱼皮为主要原料，通过较为高效的工艺制得二肽基肽酶‑IV抑制肽，该抑制肽具有很好的抑制二肽基肽酶‑4的作用，具有很好的抗高血糖的功效。

本发明公开了一种金枪鱼鱼卵二肽基肽酶Ⅳ抑制寡肽及其用途，该二肽基肽酶Ⅳ(DPP‑Ⅳ)抑制寡肽的氨基酸序列为Glu‑Ile‑Pro‑Gly‑Thr‑Arg‑Gly‑Pro‑Leu，分子量为939.07Da。本发明制备的金枪鱼鱼卵的二肽基肽酶Ⅳ(DPP‑Ⅳ)抑制寡肽可显著抑制DPP‑Ⅳ活力，降低模型小鼠餐后血糖水平，改善小鼠口服葡萄糖糖耐量和麦芽糖糖耐量，降低模型小鼠的甘油三酯(TG)和胆固醇(TC)的含量，且安全无毒副作用；可应用于制备治疗或者辅助治疗II型糖尿病的特殊医学用途食品、保健产品和药物。

本发明公开了一种青蛤血管紧张素转换酶抑制肽制备方法，包括以下步骤：（1）青蛤预处理；（2）酶解；（3）超滤分离；（4）快速蛋白纯化系统分离纯化；（5）高效液相色谱系统分离纯化。本发明以青蛤为原料，通过胰蛋白酶酶解青蛤，并利用超滤技术、快速蛋白纯化系统和高效液相色谱系统对酶解液进行分离纯化后得到一种新的血管紧张素转换酶抑制肽（ACE抑制肽），提取分离工艺合理，可操作性强，为从青蛤中制备高活性的ACE抑制肽提供了实验依据。

本发明公开了一种缢蛏血管紧张素转换酶抑制肽制备方法，包括以下步骤：（1）缢蛏预处理；（2）酶解；（3）超滤分离；（4）快速蛋白纯化系统分离纯化；（5）高效液相色谱系统分离纯化。本发明以缢蛏为原料，通过中性蛋白酶酶解缢蛏，并利用超滤技术、快速蛋白纯化系统和高效液相色谱系统对酶解液进行分离纯化后得到一种新的血管紧张素转换酶抑制肽（ACE抑制肽），提取分离工艺合理，可操作性强，为从缢蛏中制备高活性的ACE抑制肽提供了实验依据。

本发明涉及从文蛤中提取多肽技术领域，为进一步提升文蛤寡肽的提取率，本发明方法提供了一种文蛤寡肽的提取方法，将离子液体EMIMBF4与γ‑丁内酯按体积比1:1复配得到的二元体系应用在文蛤寡肽的制备上，并在低温下施加脉冲电场分解文蛤内脏组织，然后在优化酶解条件下酶解、分离、纯化，得到文蛤寡肽。本发明的文蛤寡肽制备方法中加入离子液体EMIMBF4与γ‑丁内酯按1:1混合制成复配溶剂，低温协同脉冲电场处理，然后再碱性蛋白酶酶解，所得文蛤寡肽的提取率得到提高，而且生物活性也有一定程度的提高，并且省略了0.1mol/L氢氧化钠溶液的脱脂过程。

本发明涉及脱氢酶突变体技术领域，具体涉及一种海洋新鞘脂菌短链醇脱氢酶突变体及其应用，所述海洋新鞘脂菌短链醇脱氢酶突变体以海洋新鞘脂菌短链醇脱氢酶NA‑ADH的氨基酸序列为模板，经定点突变技术获得海洋源短链醇脱氢酶突变体，经表达载体重组后转入表达菌株BL21(DE3)中得到含重组短链醇脱氢酶的菌体，然后以β‑羰基十四烷酸酯为底物，经生物酶催化制备(R)‑β‑羟基十四烷酸酯，所得(R)‑β‑羟基十四烷酸酯的手性ee值可以达到99以上，底物转化率达到95％以上，并且制备条件温和，工艺路径简洁。

本发明涉及医药技术领域，公开了一种酶法制备奥利司他中间体的方法，包括短链醇脱氢酶原始基因的合成、短链醇脱氢酶的表达、细胞破碎及酶催化等步骤，利用短链醇脱氢酶催化法制备高手性ee值(ee＞99%)的奥利司他中间体（R）‑3‑羟基‑十四烷酸甲酯，以替代传统的化学合成方法，减少生产成本及对环境的污染。本发明提供的奥利司他中间体的合成方法，反应条件更温和，反应速度更快，反应收率和手性ee值高，且生产成本低，适合工业扩大化生产。

本发明提供了一种褐藻寡糖修饰的氨基化介孔二氧化硅纳米颗粒的制备，本发明首先合成了氨基化介孔二氧化硅(MSN‑NH2)，然后将褐藻寡糖功能化修饰到带正电的内核MSN‑NH2上，得到MSN‑NH2‑AOS核壳式纳米粒子，研究了其装载和转运姜黄素的性能。本发明MSN‑NH2‑Cur‑AOS具有较高的药物传递效率，并能实现pH敏感响应性释放药物，在偏酸的肿瘤细胞中智能化释放药物，对肿瘤细胞的良好杀伤作用。