1.一种用于促进皮肤修复的透皮递送组合,其特征在于,包括:
(1)含有海绵骨针的组合物,用于预处理皮肤;
(2)外泌体囊泡冻干粉;所述外泌体囊泡冻干粉为外泌体与脂质体通过膜融合得到的外泌体囊泡,然后经冷冻干燥得到;
(3)复溶介质;在5 40℃下与所述外泌体囊泡冻干粉混合后施加于皮肤;
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所述脂质体由磷脂和胆固醇构成;所述磷脂包括功能性磷脂;所述功能性磷脂包括DC‑PT‑PE或/和PEG‑PT‑PE;
所述DC‑PT‑PE制备方法如下:将基质金属蛋白酶响应性多肽Boc‑PT‑OH、N‑羟基琥珀酰亚和碳二亚胺类缩合剂进行反应1,得到的反应液经纯化、干燥后得到Boc‑PT‑NHS;Boc‑PT‑NHS与PE类磷脂、三乙胺混合进行反应2,得到的反应液经纯化、干燥后得到Boc‑PT‑PE;将Boc‑PT‑PE脱氨基保护后得到H2N‑PT‑PE;将H2N‑PT‑PE与糖酸活化酯、三乙胺混合进行反应
3,得到的反应液经纯化、干燥后得到DC‑PT‑PE;
PEG‑PT‑PE制备方法如下:将基质金属蛋白酶响应性多肽Boc‑PT‑OH、N‑羟基琥珀酰亚和碳二亚胺类缩合剂进行反应1,得到的反应液经纯化、干燥后得到Boc‑PT‑NHS;Boc‑PT‑NHS与PE类磷脂、三乙胺混合进行反应2,得到的反应液经纯化、干燥后得到Boc‑PT‑PE;将Boc‑PT‑PE脱氨基保护后得到H2N‑PT‑PE;将H2N‑PT‑PE与聚乙二醇活化酯PEG‑NHS、三乙胺混合进行反应4,得到的反应液经纯化、干燥后得到PEG‑PT‑PE;
所述PE类磷脂为磷脂酰乙醇胺、二亚油酰基磷脂乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺,二棕榈酰磷脂酰乙醇胺和二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺中的至少一种;所述糖酸活化酯由糖酸化合物DC与N‑羟基琥珀酰亚胺、碳二亚胺类缩合剂混合进行反应5,得到的反应液经纯化、干燥后得到;所述糖酸化合物为葡萄糖酸、D(+)‑葡萄糖醛酸C和D‑木糖酸中的至少一种;所述基质金属蛋白酶响应性多肽Boc‑PT‑OH由N端至C端的氨基酸序列为:Boc‑Pro‑Leu‑X‑Gly‑[Ile/Leu]‑Ala‑OH,其中,X为Ala和Ile中的一种;Boc为叔丁氧羰基,与脯氨酸残基中的咪唑胺键链;[Ile/Leu]是指Ile或Leu;OH是指Ala残基上的羧基。
2.根据权利要求1所述的用于促进皮肤修复的透皮递送组合,其特征在于,所述外泌体囊泡的制备方法,包括以下步骤:将外泌体悬浮液与脂质体悬浮液混合并进行冻融循环,然后经挤压过孔径为200nm的聚碳酸酯膜即得到外泌体囊泡分散液,然后冷冻干燥,得到外泌体囊泡冻干粉。
3.根据权利要求1所述的用于促进皮肤修复的透皮递送组合,其特征在于,所述碳二亚胺类缩合剂为1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺或1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺;
和/或,所述PEG‑NHS的数均分子量为500 1000g/mol。
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4.根据权利要求1所述的用于促进皮肤修复的透皮递送组合,其特征在于,所述磷脂还包括中性磷脂;中性磷脂选自PE类磷脂或PC类磷脂;所述PC类磷脂为二油酰磷脂酰胆碱,二棕榈酰磷脂酰胆碱,二月桂酰磷脂酰胆碱,二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱和二硬脂酰磷脂酰胆碱中的至少一种;所述PE类磷脂为磷脂酰乙醇胺、二亚油酰基磷脂乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺,二棕榈酰磷脂酰乙醇胺和二肉豆蔻酰磷脂酰乙醇胺中的至少一种。
5.根据权利要求2所述的用于促进皮肤修复的透皮递送组合,其特征在于,所述脂质体悬浮液制备方法如下:将磷脂和胆固醇混合于溶剂中,旋蒸挥发溶剂后,加入PBS缓冲液水化、超声处理、挤压过孔径为200nm的聚碳酸酯膜得到脂质体悬浮液;
和/或,所述脂质体悬浮液制备方法如下:将磷脂、胆固醇和冻干保护剂混合于溶剂中,旋蒸挥发溶剂后,加入PBS缓冲液水化、超声处理、挤压过孔径为200nm的聚碳酸酯膜得到脂质体悬浮液;所述冻干保护剂包括聚乙二醇、多元醇和二糖中的一种或多种;所述多元醇为甘露醇和/或山梨醇;所述二糖为海藻糖和/或蔗糖;
和/或,所述外泌体悬浮液中外泌体来源于间充质干细胞、脂肪干细胞和成纤细胞中的至少一种。
6.根据权利要求1所述的用于促进皮肤修复的透皮递送组合,其特征在于,所述含有海绵骨针的组合物包括:海绵骨针和油性基质;
和/或,所述油性基质为矿物油、植物油和羊毛脂中的至少一种;
和/或,所述含有海绵骨针的组合物中海绵骨针的质量百分比为1% 4%;
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和/或,所述预处理是指将含有海绵骨针的组合物涂抹于皮肤上进行按摩1 5min,然后~抹去;
和/或,所述含有海绵骨针的组合物为膏剂、霜剂或软膏剂。
7.根据权利要求1所述的用于促进皮肤修复的透皮递送组合,所述复溶介质为pH缓冲溶液或含有竞合性共溶质的pH缓冲溶液;所述竞合性共溶质包括蔗糖、海藻糖、麦芽糖醇、甘露醇、赤藓糖醇和山梨醇中的至少一种。
8.根据权利要求7所述的用于促进皮肤修复的透皮递送组合,其特征在于,所述pH缓冲溶液为PBS缓冲液或Tris‑HCl缓冲液;所述复溶介质中,竞合性共溶质的浓度为0 5g/L。
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