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专利号: 2025111896764
申请人: 临沂大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-04-09
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种用于嗜黏蛋白阿克曼菌外源基因表达的启动子P1,其特征在于,所述启动子P1的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.一种重组载体,其特征在于,所述重组载体包括权利要求1所述的启动子P1序列;还包括与受体菌或受体细胞同源的上下游同源臂序列、Lux CDABE表达盒序列以及抗性筛选序列。

3.根据权利要求2所述的重组载体,其特征在于,所述重组载体为pCONJ4s‑Lux,其核苷酸序列如SEQ ID NO.13所示。

4.一种重组菌,其特征在于,所述重组菌包含权利要求1所述的启动子或权利要求2‑3任一所述的重组载体。

5.根据权利要求4所述的重组菌,其特征在于,所述重组菌为嗜黏蛋白阿克曼菌(Akkermansia muciniphila)SDLYAKK8‑Lux,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏日期为

2025.07.02,保藏编号为CCTCC NO:M 20251508。

6.权利要求4所述重组菌的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)筛选嗜黏蛋白阿克曼菌强启动子,其序列如SEQ ID NO.2所示;

(2)设计上下游同源臂、P1启动子、Lux CDABE表达盒和抗性筛选表达盒引物,并扩增相应片段,备用;

(3)以pCONJ4s作为骨架质粒,单酶切后与步骤(2)扩增片段进行同源重组,获取同源重组载体,所述同源重组载体的序列如SEQ ID NO.13所示;

(4)采用双交换法获取重组菌。

7.一种活体成像系统,其特征在于,包括权利要求4‑5任一所述的重组菌。

8.权利要求1所述启动子P1的应用,其特征在于,所述应用为以下任一方向:(1)在嗜黏蛋白阿克曼菌基因工程中的应用;

(2)在构建将Lux CDABE 细菌生物发光报告系统导入到嗜黏蛋白阿克曼菌体内的重组质粒中的应用;

(3)在构建含有Lux CDABE细菌生物发光报告系统的重组菌中的应用;

(4)在构建含有Lux CDABE 细菌生物发光报告系统的活体成像系统中的应用。

9.权利要求2‑3任一所述重组载体或权利要求4‑5任一所述重组菌在构建含有Lux CDABE细菌生物发光报告系统的活体成像系统中的应用。