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专利号: 2025100944603
申请人: 中国农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
更新日期:2026-05-14
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.用于检测InDel9b分子标记的引物组在鉴定水稻的苗期耐冷性中的应用,其特征在于,所述引物组包括正向引物和反向引物,所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述水稻为水稻品种日本晴、R498、渗入系 DG121、桂朝 2 号以及水稻亚种 Tej、Trj、Ind。

2.一种鉴定水稻苗期耐冷性的方法,其特征在于,包括以下步骤:

S1、提取待测样本的基因组DNA;

S2、采用权利要求1中所述的引物组对基因组DNA进行PCR扩增,得到PCR产物,所述引物组包括正向引物和反向引物,所述正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;

S3、对步骤S2所得PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳,根据电泳结果判定水稻品种的耐冷性,若得到长度分别为1169 bp和2771 bp的两个条带,判定为耐冷的水稻品种;若得到长度为2771 bp的一个条带,判定为冷敏感的水稻品种,所述水稻为水稻品种日本晴、R498、渗入系 DG121、桂朝 2 号以及水稻亚种 Tej、Trj、Ind。

3.如权利要求2所述的鉴定水稻苗期耐冷性的方法,其特征在于,步骤S2中,所述PCR扩增的体系包括5μL 2×KOD One PCR Mix、0.5 μL正向引物、0.5 μL反向引物、1 μL模板DNA和3 μL水;

所述PCR扩增的程序为94℃预热5 min;30个循环:98℃ 10 s,55℃ 10 s,68℃ 1 min;

最后68℃延伸5 min。

4.如权利要求2所述的鉴定水稻苗期耐冷性的方法,其特征在于,步骤S3中,于250‑260 v下进行1%琼脂糖凝胶电泳7‑8 min。

5.权利要求2‑4任一项所述的鉴定水稻苗期耐冷性的方法在筛选具有耐冷性的水稻品种中的应用,所述水稻为水稻品种日本晴、R498、渗入系 DG121、桂朝 2 号以及水稻亚种 Tej、Trj、Ind。

6.一种筛选耐冷水稻的分子标记育种方法,其特征在于,包括以下步骤:以权利要求5中所述的具有耐冷性的水稻品种作为亲本进行育种,采用权利要求2所述的鉴定水稻苗期耐冷性的方法鉴别育种所获杂交子的耐冷性,筛选具备耐冷性的杂交子,所述水稻为水稻品种日本晴、R498、渗入系 DG121、桂朝 2 号以及水稻亚种 Tej、Trj、Ind。